Antinukleariniai antikūnai — Dažnas vardas antikūnų grupių, nukreiptų prieš įvairius ląstelės komponentus, jų atsiradimas yra susijęs su autoimuninėmis ligomis, daugiausia.

Sinonimai: antibranduoliniai antikūnai, antibranduolinis faktorius, antibranduolinis faktorius, antikūnai prieš ekstrahuojamus branduolinius (branduolinius) antigenus, antibranduoliniai antikūnai, Hep-2 substratas, ANA-Hep2, fluorescencinis antibranduolinių antikūnų aptikimas, ANA, FANA

Antibranduoliniai antikūnai yra

antikūnų kompleksas (daugiau nei 200), daugiausia imunoglobulinų G (rečiau IgM ir IgA), atsiranda dėl autoimuninių ir reumatinių ligų autotolerancijos mechanizmo pažeidimo.

Kai kuriais atvejais imuninis atsakas yra nukreiptas ne prieš svetimus, o prieš savo audinius. Šiuo atveju jie kalba apie autoimuninė liga. Ir vadinami antikūnai, kurie gaminami prieš savo ląsteles ar jų komponentus autoimuninė.

Daugumos žmonių kraujyje yra nedidelis(!) autoantikūnų kiekis, kurie nėra ligos pasireiškimas.

Tik rimtai sutrikus imuninei sistemai, autoantikūnų lygis pakyla ir pakanka diagnozei nustatyti.

ANA gali būti teigiama net nepasireiškus pirmiesiems ligos simptomams. Apie 95% pacientų, sergančių sistemine raudonąja vilklige, kraujyje yra antinuklearinių antikūnų. Vilkligės simptomų buvimas patvirtina diagnozę.

Švietimo mechanizmas

• ultravioletinių spindulių poveikis ant odos sukelia užprogramuotą ląstelių mirtį (apoptozę), kuri yra normali organizmo reakcija, tačiau sergant sisteminėmis ligomis jos kartu masiškai migruoja.
• anksčiau nepasiekiamas ir nematomas Imuninė sistema ląstelių komponentai, tokie kaip branduoliai, histonai, branduolio membrana ir kt., yra „nuogi“, o makrofagai, užuot tiesiog „išmetę“ šią medžiagą, perduoda signalą apie ją imuninio atsako grandine.
• B-limfocitai, reaguodami į makrofagų signalą, pradeda gaminti antinuklearinius antikūnus, kurie jungiasi prie atitinkamo antigeno ir sudaro imuninius kompleksus (branduolinis antigenas + IgG antikūnas, IgM, IgA)
• imuniniai kompleksai nusėda ant bazinės membranos įvairių organų o audiniai, ypač kraujagyslės, aktyvina komplemento sistemą – vietinį uždegiminį atsaką
• rezultatas yra organo pažeidimas ir disfunkcija

Antinukleariniai antikūnai yra nukreipti prieš įvairias normalios ląstelės struktūras.

Antinuklearinių antikūnų tipai:

• anti-Ro (SS-A) - antikūnai prieš baltymus, susijusius su RNR Y1-Y5 susijungimo spliceosomose
• anti-Jo1 – antikūnai prieš citoplazminį antigeną Jo-1
• anti-Sm
• anti-La (SS-B) – antikūnai prieš baltymą, susieti su RNR polimeraze-3
• anti-Sci 70 – antikūnai prieš branduolinę topoizomerazę
• anti-U1 RNP – antikūnai prieš U1 ribonukleoproteiną
• anticentromeriniai antikūnai
• antihistoniniai antikūnai

Indikacijos

• sisteminės raudonosios vilkligės diagnozė, Šergeno sindromas

Sisteminė raudonoji vilkligė

Sisteminė raudonoji vilkligė- autoimuninė liga jungiamasis audinys ir laivai. Tai yra labiausiai rimta liga jungiamojo audinio, kuriame yra aštrūs skausmai sąnariuose, odos pažeidimas („drugelis“), serozinės membranos, širdis, inkstai, nervų sistema, plaučiai, trofiniai sutrikimai.

Simptomai

• artritas - sąnario uždegimas, pasireiškiantis skausmu, patinimu, judrumo sutrikimu, odos paraudimu ir padidėjusia temperatūra.
• išorinės širdies arba pleuros gleivinės uždegimas (arba) nežinomos kilmės
• rezultatų pokyčiai (, - baltymai arba raudonieji kraujo kūneliai šlapime)
• - sunaikinimas, kai lygis didėja
• trombocitopenija - sumažėjęs skaičius in
• - sumažintas skaičius
• odos simptomai – bėrimas, odos sustorėjimas, ypač po aktyvios
• Raynaud sindromas – periodinis pirštų ir plaštakų spalvos pakitimas (mėlynumas ir paraudimas), sumažėjęs jautrumas ir skausmas
• netipiniai neurologiniai ir psichikos simptomai
• padidėjusi kūno temperatūra, nuovargis, svorio kritimas,

Metodai

Yra du būdai, kaip nustatyti antinuklearinius antikūnus kraujyje.

Netiesioginė imunofluorescencinė mikroskopija(FANA – fluorescencinis antibranduolinių antikūnų testas) ant Hep-2 ląstelių preparato (ląstelių linija, gauta iš gerklų adenokarcinomos) – antibranduoliniai antikūnai (jei yra) jungiasi prie Hep-2 ląstelių antigenų, pridedamos specialios šviečiančios etiketės, kurios prisitvirtina. prie susidariusio komplekso ir pagal Švytėjimo intensyvumas ir tipas tiriamas naudojant mikroskopą. Geriausias metodas antinuklearinių antikūnų tyrimai. Kitas vardas - .

Tyrimo rezultatas rašomas titro forma - didžiausias kraujo praskiedimas, kai matomas švytėjimas; taip pat aprašomas fluorescencijos tipas (jei rezultatas teigiamas). Kuo daugiau antikūnų, tuo didesnis titras. Žemi titrai laikomi neigiamais, o aukšti titrai rodo padidėjusią antinuklearinių antikūnų koncentraciją.

Fluorescencijos tipai vertinant ANA:

• vienalytė (difuzinė, vienalytė) – sergant sistemine raudonąja vilklige, mišriomis jungiamojo audinio ligomis (MCTD)
• granuliuotas (granuliuotas) - nuo sisteminės raudonosios vilkligės, Sjögreno sindromo, sklerodermijos, reumatoidinio artrito ir MCTD - labiausiai nespecifinis
• branduolinis (nukleolinis) – sergant sklerodermija ir polimiozitu
• centromerinis – nuo ​​sklerodermijos ir CREST sindromo
• citoplazminis - dermatomiozitas, polimiozitas, autoimuninės kepenų ligos, pirminė tulžies cirozė

Teigiamo antinuklearinių antikūnų tyrimo rezultato pavyzdys: „ Teigiamas skiedimas/titras 1:320, vienalytis vaizdas“.

Gydytojo veiksmų algoritmas ištyrus antinuklearinius antikūnus FANA metodu

• neigiamas antinuklearinių antikūnų tyrimo rezultatas + simptomai - atlikti tyrimus: anti-Ro ir anti-Jo1
• teigiamas rezultatas antinuklearinių antikūnų analizė + simptomų buvimas / nebuvimas - atlikti anti-DNR, anti-Sm, anti-Ro, antihistonų ir anticentromerų antikūnų, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1 tyrimus - priklauso nuo ligos apraiškų

Fermentinis imunologinis tyrimas

Fermentinis imunologinis tyrimas (ELISA)) – kraujyje esantys antikūnai jungiasi su atitinkamu antigenu, todėl pasikeičia tirpalo spalva.

• mažiau nei 1,0 U – neigiamas rezultatas (normalus)
• 1,1–2,9 U – silpnai teigiamas (reikia kartoti)
• 3,0-5,9 U – teigiamas
• daugiau nei 6,0 – smarkiai teigiamas

Teigiamas antinuklearinių antikūnų tyrimo rezultatas- tai ne diagnozė, bet Šauktukas apie poreikį papildomų tyrimų. Norint kuo anksčiau nustatyti galimą ligą, reikia periodiškai atlikti išsamesnį tyrimą.

Neigiamas antinuklearinių antikūnų tyrimo rezultatas rodo jų nebuvimą kraujyje, tačiau neatmeta galimybės diagnozuoti autoimuninę ligą.

Norm

Paprastai kraujyje nėra antinuklearinių antikūnų.

Papildomi tyrimai

• bendra šlapimo analizė
• reumatiniai tyrimai - eritrocitų nusėdimo greitis (ESR),
• cirkuliuojantys imuniniai kompleksai
• Papildyti komponentą C3
• Papildykite komponentą C4

Kas turi įtakos rezultatui?

• vaistai – prokainamidas, fenitoinas, penicilinas, hidralazinas
• Ūminės kvėpavimo takų infekcijos ir peršalimas, bet kokios ūminės ar lėtinės infekcinės ligos

ANA priežastys

1. Sisteminės jungiamojo audinio ligos

• — 95-100 %, nustačius antinuklearinius antikūnus nustatoma diagnozė
• (5-25%)
• (100%)
• (30-50%)
• nepilnamečių reumatoidinis artritas (20-50%)
• (40-70%)
• (30-80%)
• (Šarpo sindromas) 100 proc.
• autoimuninis hepatitas (

Antibranduolinis faktorius

Antibranduolinis faktorius – laboratorinė analizė kuriais siekiama nustatyti įvairių tipų specifiniai imunoglobulinai ląstelės branduolio struktūroms. ANF ​​rodiklis didėja sergant sisteminėmis jungiamojo audinio ligomis. Tyrimas atliekamas siekiant diagnozuoti, diferencijuoti, stebėti gydymą, nustatyti paūmėjimus. Skirtas klinikiniams ir laboratoriniams sisteminės raudonosios vilkligės, sklerodermijos, Šarpo sindromo, Sjögreno, reumatoidinis artritas, uždegiminė miopatija. Veninio kraujo serumas tiriamas RNIF metodu. Normalus indikatorius– titras ne didesnis kaip 1:160. Bandymų duomenų paruošimo terminas yra 8 darbo dienos.

Reumatinių ligų pagrindas yra autoimuninė reakcija prieš ląstelės branduolio struktūras – baltymų ir nukleorūgščių kompleksus. Antigenai susidaro per užprogramuotą epitelio ląstelių ir limfocitų mirtį. Ultravioletiniai spinduliai, infekcijos sukėlėjai, vaistai pagreitina ląstelių sunaikinimą, lėtina apoptozinių kūnų pasišalinimą, provokuoja autoimuninių procesų vystymąsi. Antikūnai prieš branduolines struktūras yra įvairių tipų; tiriant antibranduolinį faktorių, nustatomi apie aštuonis. Tyrimo privalumas yra didelis jo specifiškumas – aptinkami antikūnai, kurių negalima išvalyti ELISA metodu. Tačiau kai kurie imuniniai kompleksai ištraukiami į plazmą atliekant RNIF, todėl yra klaidingai neigiamo rezultato tikimybė.

Indikacijos

Antinuklearinio faktoriaus tyrimas skirtas sisteminėms jungiamojo audinio patologijoms. Tyrimo skyrimo pagrindas yra:

• Simptomai reumatinė liga . Būdingos apraiškos- karščiavimas, nuovargis, silpnumas, svorio kritimas, raumenų ir sąnarių skausmas, odos bėrimai. Testas naudojamas SRV, sklerodermijos, Sjögreno sindromo, Sharpo sindromo, reumatoidinio artrito ir uždegiminių miopatijų nustatymui ir diferencijavimui.
• Laboratorinių tyrimų rezultatai. Įtarimas dėl reumatinė patologija atsiranda, kai ESR padidėjimas, lygis C reaktyvusis baltymas ir Vyriausioji rinkimų komisija. Diagnozei patvirtinti skiriamas tyrimas.
• Reumatinių ligų diagnozė. Analizė atliekama kelis kartus per metus (dažnis nustatomas individualiai), siekiant stebėti patologijos eigą, po imunosupresantų vartojimo kurso – įvertinti terapijos efektyvumą.

Pasiruošimas analizei

Biomedžiaga antibranduoliniam faktoriui nustatyti – deguonies pašalintas kraujas. Surinkimo procedūra atliekama ryte. Paruošimo taisyklės yra šios:

1. Paskutinį kartą valgykite ne vėliau kaip po 4 valandų. Gerti vandenį leidžiama bet kuriuo metu.
2. alkoholis, fiziniai pratimai, dieną prieš procedūrą reikėtų atmesti emocinius išgyvenimus.
3. Vaistų vartojimas turi būti aptartas su gydytoju. Kai kurie vaistai provokuoja antikūnų gamybą, vaistų sukeltos vilkligės vystymąsi. Vartojant gliukokortikosteroidus, galima gauti klaidingų neigiamų duomenų.
4. Instrumentinis diagnostinės procedūros, davus kraujo reikia atlikti kineziterapijos seansus.
5. Paskutines 30 minučių prieš procedūrą rūkyti draudžiama.

Laboratorijoje serumas išskiriamas iš kraujo. Antinuklearinių antikūnų nustatymas jame atliekamas RNIF metodu, naudojant HEp-2 ląstelių kultūrą. Titras vertinamas pagal didžiausią biomedžiagos praskiedimą, kuriam esant nustatoma branduolinių struktūrų liuminescencija, imunoglobulinų tipas – pagal fluorescencijos pobūdį. Analizės laikotarpis yra 6-8 dienos.

Normalios vertės

Paprastai antibranduolinio faktoriaus tyrimo rezultatas yra neigiamas. Titras yra ne didesnis kaip 1:160 suaugusiems ir vaikams. Aiškinant galutinę vertę, atsižvelgiama į šias pastabas:

• Žemi ANA titrai sumažina autoimuninės patologijos tikimybę, tačiau jos neatmeta. Sergant SLE, 5% atvejų rezultatas būna neigiamas, atliekamas antikūnų prieš SS antigenus tyrimas.
• Kvitas normalus rezultatas po imunosupresinio gydymo kurso patvirtina jo sėkmę.
• Neigiamas rezultatas autoimuninės patologijos simptomų fone reikalauja papildomų tyrimų (NCA, ANA pagal ELISA).

Rodiklio didinimas

Antibranduoliniai antikūnai neturi citotoksinių savybių, tačiau jiems prisijungus prie antigenų susidaro imuniniai kompleksai, kurie sukelia kraujagyslių sienelių uždegimą. Jie pasireiškia odos, glomerulų, sąnarių membranų ir pleuros pažeidimais. Išryškėja sisteminėms patologijoms būdingi simptomai. Galimas ligas lemia švytėjimo tipas su minimaliu serumo praskiedimu:

• Homogeniškas. Difuzinė fluorescencija rodo, kad yra antikūnų prieš ds DNR ir histonus. Nustatyta sergant SRV ir vaistų sukelta vilkligė.
• Periferinis. Liuminescencijos tipas nustatomas pagal chromatino vietą ir aptinkamas esant Ig DNR komponentams, būdingiems SRV.
• granuliuotas. Antigenai yra nukleoproteinų kompleksai. Švytėjimas yra nespecifinis, aptinkamas daugelyje reumatinės ligos. Didelis titras ir stambiagrūdė fluorescencija labiausiai būdingi Sharpe'o sindromui.
• Branduolinės. Atspindi specifinio Ig buvimą branduolio struktūrose. Aptinka sklerodermiją ir Sjögreno sindromą. Retai stebimas sergant endokrinopatijomis, odos patologijomis ir organų persodinimu.
• Centromerinis. Antigenai yra chromosomų centromerai. Švytėjimas patvirtina ribotą sklerodermiją.
• Citoplazminis. Jį išprovokuoja tRNR sintetazės (Jo-1), ribosomų ir organelių antikūnų buvimas. Leidžia nustatyti uždegimines miopatijas ir autoimuninius kepenų pažeidimus.
• Mitochondrijų. Antigenai yra piruvato dekarboksilazės komplekso komponentai. Švytėjimas būdingas pirminei tulžies cirozei.
• Vieta. Susijęs su antikūnų prieš nukleoproteinus cirkuliacija, susijęs su autoimuniniu kepenų pažeidimu.

Indikatoriaus sumažėjimas

Rodiklio sumažėjimas stebėjimo metu turi prognostinę reikšmę sisteminės ligos jungiamasis audinys. ANA lygiai koreliuoja su aktyvumu patologiniai procesai, todėl jų koncentracijos sumažėjimas yra remisijos ir gydymo sėkmės požymis.

Žmogaus imuninė sistema yra unikalus, gerai koordinuotas mechanizmas, galintis reaguoti į bet kokį išorinį patogeninių veiksnių įvedimą ir taip apsaugoti organizmą nuo daugelio ligų. Tačiau, kaip žinote, kiekvienai taisyklei yra išimčių tokiu atveju jie atrodo kaip imuninė sistema reaguoja į savo ląsteles, o tai vadinama autoimuninės ligos.

Sergant šiomis patologijomis, gaminami antikūnai, kurie atakuoja sveikas ląsteles, jas pažeidžia arba naikina. Dėl to sutrinka atskirų audinių struktūrų ir net organų veikla. Tokios patologijos dėl išplitimo ir kelių organų ar sistemų įtraukimo į procesą vadinamos sisteminėmis ligomis.

Kada šiuolaikiniai metodai laboratorinė diagnostika, vienas iš jų – ANF kraujo tyrimas antibranduolinio faktoriaus paieškai, leidžiantis nustatyti antinuklearinius (antinuklearinius) antikūnus ir nustatyti patologijos priežastį. Šis indikatorius yra vienas iš sisteminių jungiamojo audinio ligų (SCTD) žymenų, priimtas kaip „auksinis standartas“ tokio tipo tyrimams.

Pagrindinės sąvokos, apibūdinančios LPS

Kaip jau buvo aprašyta aukščiau, šių patologijų patogenezė kyla dėl imuninės sistemos veikimo sutrikimų ir apsauginių antikūnų prieš tam tikrus savo ląstelių komponentus gamybos. Dėl savo kilmės ypatumų tokios ląstelės turi antrą pavadinimą – autoantikūnai. Imuniteto susilpnėjimo proceso metu jie liečiasi su branduolio baltyminiais junginiais, nukleino rūgštimis ir citoplazmos antigenais, todėl atsiranda simptomų. uždegiminės ligos, toks kaip:

• struktūriniai audinių ir organų pokyčiai;
• stiprus nepagrįstas nuovargis;
• skausmingi pojūčiai raumenyse ir sąnariuose;
• odos pažeidimas;
• kūno svorio netekimas ir kt.

Antinukleariniai antikūnai (ANA) gali susidaryti esant gana įvairioms autoimuninėms patologijoms, tačiau dažniausiai jie atsiranda sergant sistemine raudonąja vilklige (SRV).

ANF ​​reikia vartoti, jei yra užsitęsimo požymių uždegiminis procesas

Nuoroda! Remiantis statistika, daugiau nei 90% pacientų, sergančių CTD, patologiškai gamina tokius antikūnus. Šiuo metu ištirta apie 200 jų rūšių, kurios gavo bendrinį pavadinimą – antibranduolinis faktorius. Jas daugiausia atstovauja G klasės imunoglobulinai, tačiau kartais randama M arba A.

Antinuklearinio faktoriaus kraujo tyrimo esmė

Prieš gilinantis į ANF tyrimų atlikimo specifiką, verta paminėti, kad technika buvo išrasta ir pradėta naudoti gana seniai – praėjusio amžiaus 60-aisiais. Tačiau diagnostikos praktikoje jis plačiai paplito tik XX amžiaus 80-ųjų pradžioje po patobulinimų. Dar 1961 metais mokslininkas Beckas naudojo laboratorinių gyvūnų ląsteles kaip substratą, o tik 1982 metais Tanas naudojo ištisinę žmogaus ląstelių liniją HEp-2, ieškodamas ANF.

Nors pagrindinis šio tyrimo tikslas yra nustatyti raudonosios vilkligės diagnozę, jis vis dar laikomas universaliu kitų kolageno ligų (CCD) metodu. Pastarieji apima:

• sklerodermija;
• dermatomiozitas;
• mazginis periarteritas;
• lėtinis aktyvus hepatitas ir kt.

Vienas iš patogiausių, todėl dažniausiai naudojamų antibranduolinio faktoriaus nustatymo pacientų kraujyje metodų yra netiesioginė imunofluorescencija. Tyrimas atliekamas žmogaus gerklų adenokarcinomos HEp-2 (turinčios tam tikrą skaičių branduolinių antigenų) ištisinės epitelioidinės linijos ląstelėms kraujo serumu patepant pažymėtą konjugatą (junginį) su antikūnais.

Toks pasirinkimas nebuvo atsitiktinai – HEp-2 ląstelės yra labai patogus substratas tiriant biomedžiagas. Jie turi gana didelius branduolius, o pasodinti ant laboratorinio stiklo išauga vienu sluoksniu. Kitos žmogaus ląstelių linijos gali būti naudojamos kaip substratas, tačiau sėkminga morfologija ir auginimas aiškiai paverčia HEp-2 nepakeičiama medžiaga.

Diagnozės metu, kai paciento serumas yra inkubuojamas su ląstelės substratu, esant ANA, jie susijungia su atitinkamais branduolio antigenais. ANF ​​surišimo su HEp-2 vietos nustatomos naudojant konjugatą, pažymėtą fluoresceinu (dažiu). Įvykusių reakcijų rezultatams įvertinti naudojamas fluorescencinis mikroskopas, leidžiantis atskirti susidariusių raiščių pobūdį ir mastą.

Fluorescencinis mikroskopas laboratoriniams tyrimams ANF

Nuoroda! Žmogaus HEp-2, priešingai nei gyvūnų audinių kriosekcijos, pasižymi didesniu ląstelių dalijimosi greičiu, todėl galima aptikti antikūnus prieš antigenus, kurie ekspresuojami tik dalijimosi metu. Taip pat žmogaus substrate trūksta ląstelinės matricos, dėl ko sumažėja tiriamos liuminescencijos vizualizacijos kokybė.

Kokios antigenų grupės naudojamos tyrime?

Iššifruojant medžiagas visada reikia atsižvelgti į tai, kad ANA spektras apima gana didelę autoantikūnų grupę prieš nukleoproteinus, ribonukleoproteinus, histonus, DNR ir kt. struktūriniai vienetai branduoliai. Iš to išplaukia, kad testo funkcionalumas yra skirtas identifikuoti antikūnus prieš branduolio ir citoplazmos komponentus, kurie iš pradžių buvo nustatyti sergant SLE.

Vėliau tyrimo diagnostikos galimybės buvo išplėstos, nes buvo aptikta panašių antikūnų kitose KTD. Atrankos metoduose, skirtuose bendros ANA aptikti, paprastai naudojamas tam tikras antigenų rinkinys, kuris laikomas pagrindiniais autoimuninių CTD žymenimis.

Tai apima antikūnus IgG klasė:

• SS-A (Ro) – branduoliniai ribonukleoproteinai;
• SS-B (La) – branduoliniai baltymai;
• Scl-70 – fermento baltymas (topoizomerazė-1);
• natūrali dvigrandė DNR;
• RNP/Sm – antigenų kompleksas;
• Jo-1 – RNR sintetazės fermentas;
• CENP-B (centromeras)
• Hep-2 ląstelės;
• mitochondrijos (PDC).

ANA praktiškai nekenksmingos organizmui – jos nepajėgios prasiskverbti į gyvus audinius. Tačiau kai kuriais atvejais jie gali susijungti į antigeno-antikūnų kompleksus, o tai galiausiai sukelia struktūrinį audinių sunaikinimą. Vienas iš tokių pavyzdžių yra inkstų parenchimos pažeidimas sergant SRV. Kadangi CTD procese dalyvauja keli organai, ANA nustatymas nėra svarbiausias diagnozei, o laikomas tik tam tikrų simptomų patvirtinimu.

ANF ​​analizės galimybės išreikštos procentais

Gautų rezultatų tyrimas

Po visko reikalingos procedūros– biomedžiagos paėmimas ir paruošimas laboratoriniams tyrimams, rezultatų įvertinimas ir interpretavimas. Tai apima antikūnų titro (koncentracijos) ir švytėjimo tipo nustatymą. Svarbus diagnostikos parametras yra didesnė nei 1:160 koncentracijos vertė. Pavyzdžiui, reumato paūmėjimo metu jis gali viršyti 1:640, o remisijos laikotarpiu sumažėja iki 1:160–1:320.

Liuminescencijos tipas rodo ANA taikinius, o tai yra ypač svarbus klinikinis taškas, kuris lemia tolesnius gydytojo veiksmus skiriant vaistą. diagnostinės priemonės. Atsižvelgiant į branduolių liuminescencijos pobūdį naudojant HEp-2, bus nustatyta daugiau nei 20 branduolio dažymo variantų, atsižvelgiant į biomedžiagoje esančių antikūnų tipus. Tarp pagrindinių yra šių tipųšvytėjimas.

• Periferinis. Švytėjimas rodo anti-DNR antikūnų buvimą, o tai patvirtina SLE. Pagrindiniai periferinio tipo antigenų tipai yra histono baltymai ir DNR.
• Difuzinis (homogeniškas). Šis švytėjimas stebimas sergant SRV, kartu su inkstų struktūros pažeidimu ir panašiomis CTD, nefritu, sklerodermija, taip pat vaistų sukelta SRV. Šio tipo antigenus atstovauja dsDNR, histonatai ir nukleosomos.
• Branduolinis (branduolinis). Šis tipas būdingas sisteminei sklerodermijos formai, jį lemia antikūnų buvimas pacientams – RNR polimerazė 1, PM/Scl, NOR, U3RNP.
• Citoplazminis. Šio tipo paryškinimas rodo ANA buvimą tRNR sintetazėse, būtent Jo-1, ir stebimas sergant polimiozitu.
• Granuliuotas. Nustatyta sergant Sjögreno sindromu, infekcinė mononukleozė, mišrus CTD (Sharp sindromas, MCTD) ir vaistų sukeltas vilkligės sindromas. Vyraujantys šio tipo antigenai yra SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP ir PCNA.
• Stambios granulės. Tai būdinga mišrioms CTD ir, daugelio mokslininkų nuomone, yra susijusi su RNP antigeno buvimu.
• Smulkios granulės. Nustatomas antikūnų, susidariusių prieš ribonukleininius baltymus – ASSP (ACCP), SS-A, SS-B ir kt., buvimas. Tokie antikūnai būdingi SRV, taip pat specifiniai odos formos, reumatoidinis artritas, sklerodermija, polimiozitas, Sjogreno sindromas.
• Centromerinis. Šis tipas dažniausiai stebimas sergant sklerodermija. Nors viename kraujo mėginyje, ypač pacientams, sergantiems difuzine KTD, atskirtoje plazmoje galima aptikti antikūnų prieš įvairius branduolinius komponentus.
• Taškiniai intarpai šerdyje. Šis tipas dažniausiai nustatomas sergant autoimuninio pobūdžio kepenų ligomis. Jis gali sujungti keletą fluorescencinių tipų, pavyzdžiui, branduolinį ir smulkią granuliuotą, kurį sukelia antikūnai prieš Scl-70.

Nuoroda! Pastebėta, kad didėjant plazmos biomedžiagos praskiedimui, liuminescencijos parametrai gali keistis, nes daugeliui antikūnų būdingas aktyvumo pokytis, kai įvairaus laipsnio koncentracija.

Veiksniai, galintys iškreipti rezultatus

Tyrimo metu gautų duomenų patikimumui įtakos gali turėti tik keli veiksniai, galintys parodyti ir klaidingai teigiamą, ir klaidingai neigiamą rezultatą. Taigi neįtikimas atsakas su poslinkiu į viršų stebimas vyresniems nei 60 metų pacientams (statistikos duomenimis, 10–37 proc. atvejų) ir vartojant vaistus, sukeliančius vaistų sukeltą vilkligę (kai kuriuos antibiotikus, kontraceptikus, sulfonamidus, tiazidus). diuretikai).

Pastebėta, kad 5–55 proc krūtu implantai, padidėja ANA koncentracijos lygis. Vartojant gliukokortikoidinius vaistus – prednizoloną, metipredą ar deksametazoną, gali būti nustatyta klaidinga diagnozė, slenkant žemyn.

Remiantis antikūnais ir nustatant jų koncentraciją kraujo plazmoje, diagnozuojama daug organizmo būklių. Vienas iš rodiklių yra antibranduolinis faktorius, kuris savo pavadinimu jungia antikūnų grupę Įvairios rūšys, nukreiptas prieš ląstelių komponentus. Nustačius tokį veiksnį, prasminga kalbėti apie autoimuninę ligą, ypač sisteminę raudonąją vilkligę.

Nors testas yra universalus nustatant daugelį sisteminių organizmo patologijų, ypač tokiai rimtai ligai kaip raudonoji vilkligė, kai kurios įdomių savybių. Jis pradėtas naudoti nuo 1957 m., Tačiau technika plačiai paplito tik praėjusio amžiaus 80-ųjų pabaigoje. Verta paminėti, kad implantų buvimas krūtyje padidina antinuklearinių antikūnų titrą, kuris stebimas nuo 5% iki 55% visų atvejų moterims.

Kas jie tokie?

Antikūnų kompleksas, apimantis antinuklearinį faktorių, yra atstovaujamas daugiau nei 200 rodiklių, dažniausiai tai yra G klasės imunoglobulinai. retais atvejais IgM ir IgA. Jie atsiranda esant patologijoms, kurioms būdingas autoimuninis ar reumatinis pažeidimo pobūdis, nes imuninė sistema netoleruoja savo audinių.

Tam tikromis sąlygomis imuninė sistema nukreipia visas savo jėgas ne kovoti su svetimais veiksniais, o prieš savo audinius ir ląsteles, o tai paprastai neturėtų atsitikti. Pažeidžiama tolerancija tam tikroms ląstelėms, į kurias nukreipta agresija, ir išsivysto autoimuninė liga. Ligos proceso metu susidarantys antikūnai arba kompleksai vadinami autoimuniniais.

Daugelis žmonių to nedaro dideli kiekiai yra autoantikūnų, bet tai nėra ligos požymis. Tik rimtas imuninės sistemos sutrikimas gali padidinti autoantikūnų kiekį, tai yra priežastis atlikti tinkamą diagnozę. Tačiau jis vis tiek turi būti papildytas kitais tyrimais, ypač krauju, šlapimu, taip pat klinikinėmis apraiškomis.

Asmeniui, sergančiam sistemine raudonąja vilklige, ANF padidėja net nepasireiškus pirmiesiems simptomams. 95% visų pacientų kraujyje yra padidėjęs antinuklearinis faktorius, kurį papildo ligos simptomai, o tai savo ruožtu patvirtina diagnozę.

Veiksnio atsiradimo mechanizmas

Yra keletas priežasčių, kurios prisideda prie ligos vystymosi žmonėms. Viskas vyksta tam tikra seka:

1. Veikiant saulės ultravioletinei spinduliuotei, odoje suaktyvėja iš anksto genetiškai užprogramuoti ląstelių mirties procesai, vadinami apoptoze. Tai normali reakcija organizmo, tačiau sergant sisteminio pobūdžio ligomis limfocitai pradeda intensyviai migruoti.
2. Anksčiau neprieinami, nematomi ląstelių komponentai tampa prieinami imuninei sistemai, ypač ląstelės membrana, branduoliai, histonai, branduolio membrana ir kt. Jie tampa nuogi, o makrofagai, užuot perdirbę tokią medžiagą, perduoda informaciją toliau, provokuodami organizmo imuninį atsaką.
3. B-limfocitai reaguoja į makrofagų duotą signalą, gamindami antinuklearinius antikūnus; jie sąveikauja su atitinkamu antigenu, sudarydami kompleksą.
4. Kompleksai nusėda ant organų ir audinių membranų; tai gausiai atsiranda kraujagyslės sienelės paviršiuje iš vidaus; suaktyvėja komplementas arba vietinis imuninis atsakas.
5. Pažeidus sutrinka organų veikla.

Analizė, indikacijos

Yra keletas indikacijų, kada skiriamas antinuklearinių antikūnų tyrimas. Visų pirma, kyla įtarimas dėl sisteminės raudonosios vilkligės, Sjögreno sindromo, išsivystymo. Jei yra viena sisteminė liga, gydytojas įtaria kitą, pavyzdžiui, vilkligės fone gali išsivystyti antifosfolipidinis sindromas.

Simptomai ir kada atlikti tyrimą

Visada yra simptomų, kurių atsiradimas turėtų įspėti žmogų ir priversti jį ištirti. Gydytojas turėtų orientuoti pacientą, jei yra:

1. Artritas, pasireiškiantis sąnario uždegimu, skausmu, patinimu, judrumo sutrikimu, odos paraudimu virš jo, padidėjusia temperatūra.
2. Ištyrimas dėl perikardito ir pleurito, kurių priežastis nežinoma, nepakenktų.
3. Inkstų pažeidimas, susijęs su imuninės sistemos sutrikimu, šlapimo analizės pokyčių atsiradimu, ypač baltymų, kraujo.
4. Kita indikacija – hemolizinis anemijos variantas, kai dideliais kiekiais sunaikinami raudonieji kraujo kūneliai, padidėja bilirubino kiekis kraujyje ir šlapimo tyrimas.
5. Indikacija yra trombocitų ir neutrofilų kiekio sumažėjimas leukocitų formulėje.
6. Apraiškos ant odos bėrimų, sustorėjimų, atsirandančių po saulės poveikio.
7. Raynaud sindromas, kai rankų ir kojų pirštai periodiškai keičia spalvą. Jie tampa blyškūs, mėlyni ar raudoni, sutrinka jautrumas, nerimauja skausmas.
8. Indikacija yra nebūdingi neurologijos ar psichiatrijos simptomai.
9. Jei pakyla temperatūra, atsiranda nuovargis, mažėja kūno svoris, padidėja limfmazgiai.

Tyrimų tipai

Yra du metodai, leidžiantys nustatyti antinuklearinius antikūnus kraujyje. Pirmasis vadinamas netiesiogine imunofluorescencine mikroskopija. Jos ląstelių linija buvo gauta iš adenokarcinomos gerklėje. Jei yra antinuklearinių antikūnų, jie jungiasi prie specifinių antigenų, o po to pridedami žymenys, galintys švytėti tam tikrame šviesos spektre. Mikroskopu tampa įmanoma nustatyti švytėjimo intensyvumą ir tipą.

Šis metodas pripažintas geriausiu antinuklearinių antikūnų kiekiui nustatyti. Jis turi kitą pavadinimą – vilkligės tyrimo juostelės.

Tyrimo rezultatas – švytėjimą suteikiantis titras arba maksimalus kraujo praskiedimas. Jei rezultatas teigiamas, aprašomas švytėjimo tipas. Titras didėja su dideliu antikūnų kaupimu. Žemas titras gali būti laikomas neigiamu rezultatu, o aukštas titras gali rodyti, kad antinuklearinių antikūnų koncentracija didėja.

Antrasis diagnostikos variantas yra fermentinis imunologinis tyrimas. Jo esmė ta, kad kraujyje esantys antikūnai liečiasi su atitinkamu antigenu, todėl tirpalas pakeičia spalvą.

Verta paminėti, kad teigiamas testo rezultatas nėra 100% diagnozė. Tai signalas, ko reikia papildoma ekspertizė kurie padės nustatyti ligą ankstyvas laikotarpis, paskirti gydymą. Jei antibranduolinių veiksnių testas yra neigiamas, galime kalbėti apie juos visiškas nebuvimas, tačiau neatmetama įtariamos autoimuninės patologijos diagnozė.

Privaloma atlikti įvairių rodiklių kraujo tyrimus. Tačiau verta atminti, kad rezultatams įtakos gali turėti tam tikrų vaistų vartojimas, taip pat ūminis ar lėtinės ligos. Specialistas visada padės suprasti visas subtilybes, po kurių nustatys diagnozę ir rekomenduos, ką daryti toliau.

Antibranduolinis faktorius

Antibranduolinis faktorius– laboratorinė analizė, kuria siekiama nustatyti įvairių tipų specifinius imunoglobulinus, skirtus ląstelės branduolio struktūroms. ANF ​​rodiklis didėja sergant sisteminėmis jungiamojo audinio ligomis. Tyrimas atliekamas siekiant diagnozuoti, diferencijuoti, stebėti gydymą, nustatyti paūmėjimus. Skiriama esant klinikiniams ir laboratoriniams sisteminės raudonosios vilkligės, sklerodermijos, Sharpo sindromo, Sjogreno sindromo, reumatoidinio artrito, uždegiminės miopatijos požymiams. Veninio kraujo serumas tiriamas RNIF metodu. Normalus indikatorius yra titras ne didesnis kaip 1:160. Bandymų duomenų paruošimo terminas yra 8 darbo dienos.

Reumatinės ligos grindžiamos autoimunine reakcija prieš ląstelės branduolio struktūras – baltymų ir nukleorūgščių kompleksus. Antigenai susidaro per užprogramuotą epitelio ląstelių ir limfocitų mirtį. Ultravioletiniai spinduliai, infekcijos sukėlėjai, vaistai pagreitina ląstelių sunaikinimą, lėtina apoptozinių kūnų pasišalinimą, provokuoja autoimuninių procesų vystymąsi. Antikūnai prieš branduolines struktūras yra įvairių tipų; tiriant antibranduolinį faktorių, nustatomi apie aštuonis. Tyrimo privalumas yra didelis jo specifiškumas – nustatomi antikūnai, kurių negalima išvalyti ELISA metodu. Tačiau kai kurie imuniniai kompleksai ištraukiami į plazmą atliekant RNIF, todėl yra klaidingai neigiamo rezultato tikimybė.

Indikacijos

Antinuklearinio faktoriaus tyrimas skirtas sisteminėms jungiamojo audinio patologijoms. Tyrimo skyrimo pagrindas yra:

• Reumatinės ligos simptomai. Būdingos apraiškos yra karščiavimas, nuovargis, silpnumas, svorio kritimas, raumenų ir sąnarių skausmas, odos bėrimas. Testas naudojamas SRV, sklerodermijos, Sjögreno sindromo, Sharpo sindromo, reumatoidinio artrito, uždegiminių miopatijų nustatymui ir diferencijavimui.
• Laboratorinių tyrimų rezultatai. Įtarimas dėl reumatinės patologijos kyla, kai padidėja AKS, C reaktyvaus baltymo ir CEC kiekis. Diagnozei patvirtinti skiriamas tyrimas.
• Reumatinių ligų diagnozė. Analizė atliekama kelis kartus per metus (dažnis nustatomas individualiai), siekiant stebėti patologijos eigą, po imunosupresantų vartojimo kurso – įvertinti terapijos efektyvumą.

Pasiruošimas analizei

Biomedžiaga antinukleariniam faktoriui nustatyti – veninis kraujas. Surinkimo procedūra atliekama ryte. Paruošimo taisyklės yra šios:

1. Paskutinį kartą valgykite ne vėliau kaip po 4 valandų. Gerti vandenį leidžiama bet kuriuo metu.
2. Dieną prieš procedūrą reikėtų vengti alkoholio, fizinio aktyvumo, emocinių išgyvenimų.
3. Vaistų vartojimas turi būti aptartas su gydytoju. Kai kurie vaistai provokuoja antikūnų gamybą, vaistų sukeltos vilkligės vystymąsi. Vartojant gliukokortikosteroidus, galima gauti klaidingų neigiamų duomenų.
4. Po kraujo davimo turi būti atliekamos instrumentinės diagnostikos procedūros ir fizioterapijos seansai.
5. Paskutines 30 minučių prieš procedūrą rūkyti draudžiama.

Laboratorijoje serumas išskiriamas iš kraujo. Antinuklearinių antikūnų nustatymas jame atliekamas RNIF metodu, naudojant HEp-2 ląstelių kultūrą. Titras vertinamas pagal didžiausią biomedžiagos praskiedimą, kuriam esant nustatoma branduolinių struktūrų liuminescencija, imunoglobulinų tipas – pagal fluorescencijos pobūdį. Analizės laikotarpis yra 6-8 dienos.

Normalios vertės

Paprastai antibranduolinio faktoriaus tyrimo rezultatas yra neigiamas. Titras yra ne didesnis kaip 1:160 suaugusiems ir vaikams. Aiškinant galutinę vertę, atsižvelgiama į šias pastabas:

• Žemi ANA titrai sumažina autoimuninės patologijos tikimybę, tačiau jos neatmeta. Sergant SLE, 5% atvejų rezultatas būna neigiamas, atliekamas antikūnų prieš SS antigenus tyrimas.
• Normalaus rezultato gavimas po imunosupresinio gydymo kurso patvirtina jo sėkmę.
• Neigiamas rezultatas autoimuninės patologijos simptomų fone reikalauja papildomų tyrimų (NCA, ANA pagal ELISA).

Rodiklio didinimas

Antibranduoliniai antikūnai neturi citotoksinių savybių, tačiau jiems prisijungus prie antigenų susidaro imuniniai kompleksai, kurie sukelia kraujagyslių sienelių uždegimą. Jie pasireiškia odos, glomerulų, sąnarių membranų ir pleuros pažeidimais. Išryškėja sisteminėms patologijoms būdingi simptomai. Galimas ligas lemia švytėjimo tipas su minimaliu serumo praskiedimu:

• Homogeniškas. Difuzinė fluorescencija rodo, kad yra antikūnų prieš ds DNR ir histonus. Nustatyta sergant SRV ir vaistų sukelta vilkligė.
• Periferinis. Liuminescencijos tipas nustatomas pagal chromatino vietą ir aptinkamas esant Ig DNR komponentams, būdingiems SRV.
• granuliuotas. Antigenai yra nukleoproteinų kompleksai. Švytėjimas yra nespecifinis ir būdingas daugeliui reumatinių ligų. Didelis titras ir stambiagrūdė fluorescencija labiausiai būdingi Sharpe'o sindromui.
• Branduolinės. Atspindi specifinio Ig buvimą branduolio struktūrose. Aptinka sklerodermiją ir Sjögreno sindromą. Retai stebimas sergant endokrinopatijomis, odos patologijomis ir organų persodinimu.
• Centromerinis. Antigenai yra chromosomų centromerai. Švytėjimas patvirtina ribotą sklerodermiją.
• Citoplazminis. Jį išprovokuoja tRNR sintetazės (Jo-1), ribosomų ir organelių antikūnų buvimas. Leidžia nustatyti uždegimines miopatijas ir autoimuninius kepenų pažeidimus.
• Mitochondrijų. Antigenai yra piruvato dekarboksilazės komplekso komponentai. Švytėjimas būdingas pirminei tulžies cirozei.
• Vieta. Susijęs su antikūnų prieš nukleoproteinus cirkuliacija, susijęs su autoimuniniu kepenų pažeidimu.

Indikatoriaus sumažėjimas

Rodiklio sumažėjimas turi prognostinę reikšmę stebint sistemines jungiamojo audinio ligas. ANA lygis koreliuoja su patologinių procesų aktyvumu, todėl jų koncentracijos sumažėjimas yra remisijos ir gydymo sėkmės požymis.

Anomalijų gydymas

Antinuklearinio faktoriaus testas leidžia aptikti antikūnus prieš branduolinius antigenus ir nustatyti jų tipą. Dėl šios priežasties analizė plačiai naudojama diferencinė diagnostika reumatinės ligos. Norėdami interpretuoti rezultatą ir paskirti gydymą, turite kreiptis į gydytoją - reumatologą, imunologą, dermatovenerologą.

Panašūs straipsniai