PGR tyrimo sistema Staphylococcus aureus nustatymui. Stafilokokų sukeltos infekcijos

Jie priklauso Micrococcoceae šeimai. Staphylococcus genčiai priklauso 19 rūšių, iš kurių tik kelios yra patogeniškos žmogui: S.aureus, S.epidermidis ir S.saprophyticus. Ligas sukelia aureusas, rečiau – epiderminis, dar rečiau – saprofitiniai stafilokokai.

Morfologija, fiziologija. Atskiros ląstelės turi taisyklingo rutulio formą, daugindamosi susidaro grupes vynuogių kekių pavidalu (slaphyle – vynuogių kekė). Dydis nuo 0,5 iki 1,5 mikrono. Preparatuose iš patologinės medžiagos (iš pūlių) jie yra pavieniui, poromis arba mažomis grupėmis. Staphylococcus aureus turi galimybę suformuoti subtilią kapsulę.

Stafilokokai yra fakultatyviniai anaerobai, bet geriau vystosi aerobinėmis sąlygomis, Gr+. Tankios mitybinės terpės paviršiuje formuoja apvalias, išgaubtas, pigmentines (auksines, gelsvai gelsvas, citrinos geltonas, baltas) kolonijas lygiais kraštais; skysčiuose – vienodas drumstumas. Laboratorijose jie naudoja stafilokokų gebėjimą daugintis aplinkoje, kurioje yra daug (6-10%) NaCl. JSA). Kitos bakterijos negali toleruoti tokios druskos koncentracijos, druskos aplinka yra selektyvi stafilokokams. Staphylococcus aureus padermės, gaminančios hemolizinus, sukuria kolonijas ant kraujo agaro, apsuptos hemolizės zonos.

Stafilokokai turi daugybę fermentų, kurie skaido daugybę angliavandenių ir baltymų. Gliukozės fermentacijos tyrimas anaerobinėmis sąlygomis. Iš patogenezėje dalyvaujančių fermentų stafilokokinės infekcijos, S.aureus būdinga tik plazmakoagulazė ir iš dalies DNazė. Kiti fermentai (hialuronidazė, proteinazė, fosfatazė, muromidazė) yra kintami (tačiau dažniau juos gamina S.aureus). Stafilokokai sintetina bakteriocinus. Atsparus penicilinui (penicilinazei).

Antigenai. Ląstelių sienelės medžiagos: peptidoglikanas, teikhoinės rūgštys, baltymas A, tipui būdingi agliutinogenai, taip pat polisacharidinio pobūdžio kapsulė. Peptidoglikanas turi bendrų antigenų su mikrokokų ir streptokokų peptidoglikanais. Teiko rūgščių antigeniškumas siejamas su amino cukrumi. Baltymai A Staphylococcus aureus gali nespecifiškai prisijungti prie IgG Fc fragmento, todėl jį agliutinuoja normalus žmogaus serumas. Stafilokokai turi 30 baltymų tipui specifinių antigenų. Tačiau tarpspecifinis diferencijavimas pagal Ar struktūrą praktiškai nenaudojamas.

Patogeniškumas. Toksinai ir fermentai turi žalingą poveikį žmogaus kūno ląstelėms ir audiniams. Patogeniškumo veiksniai taip pat apima kapsulę, kuri užkerta kelią fagocitozei ir fiksuoja komplementą, taip pat baltymą A, kuris inaktyvuoja komplementą ir slopina opsonizaciją sąveikaujant su IgG Fc fragmentu.

S.aureus gali išskirti daugybę toksinų, ypač leukocidiną, kuris neigiamai veikia fagocitines ląsteles, daugiausia makrofagus. Hemolizinai (α, β, delta, γ) turi lizuojantį poveikį žmogaus ir gyvūnų eritrocitams (triušiams, arkliams, avims). Pagrindinis – S. aureus gaminamas α-toksinas. Be hemolizinio, šis nuodas turi kardiotoksinį poveikį ir sukelia spazmus vainikinių kraujagyslių ir širdies sustojimas sistolės metu, paveikia nervines ląsteles ir neuronus, lizuoja ląstelių membranas ir lizosomas, todėl išsiskiria lizosomų fermentai.

Apsinuodijimas stafilokoku maistu yra susijęs su Staphylococcus aureus gaminamų enterotoksinų poveikiu. Yra žinomi 6 įvairių enterotoksinų (ABCDEF) antigenai.

Eksfoliaciniai toksinai sukelia pemfigus, vietinį pūslinį impetigą ir generalizuotą raudoną panašų bėrimą naujagimiams. Ligas lydi intraepiderminis odos epitelio atsiskyrimas, susiliejančių pūslių susidarymas, kurių skystis yra sterilus. Stafilokokinės infekcijos židinys dažniausiai būna bambos žaizdoje.

Eksperimentai: plazmos koagulazė vykdo plazmos krešėjimą (atrodo, kad baltymai yra padengti pluoštiniu apvalkalu, kuris apsaugo juos nuo fagocitozės). Didelė koagulazės koncentracija paciento organizme sukelia periferinio kraujo krešėjimo sumažėjimą, hemodinamikos sutrikimus ir progresuojantį audinių deguonies badą.

Hialuronidazė skatina stafilokokų plitimą audiniuose. Lecitinazė naikina lecitiną, kuris yra ląstelių membranų dalis, sukelia leukopeniją. Fibrinolizinas ištirpina fibriną, apribodamas vietinį uždegiminį židinį, kuris prisideda prie patologinio proceso apibendrinimo. Kitų stafilokokų egzofermentų (DNazės, muramidazės, proteinazės, fosfatazės), dažnai lydinčių koaguliazės aktyvumą, patogenetinės savybės dar nenustatytos.

Ekologija ir paskirstymas. Pirmosiomis žmogaus gyvenimo dienomis stafilokokai nusėda ant burnos, nosies, žarnyno gleivinių, taip pat ant odos ir yra besiformuojančios normalios žmogaus organizmo mikrofloros dalis.

Stafilokokai nuolat patenka į aplinką iš žmonių. Jų yra ant namų apyvokos daiktų, ore, vandenyje, dirvožemyje ir ant augalų. Tačiau jų patogeninis aktyvumas skiriasi, Ypatingas dėmesys yra skiriamas Staphylococcus aureus kaip potencialiai patogeniškas žmonėms. Patekę į infekcijos šaltinį, ne visi žmonės tampa S. aureus nešiotojais. Bakterijų pernešimo susidarymą palengvina mažas SIgA kiekis nosies sekrete ir kitos funkcinio nepakankamumo apraiškos. Imuninė sistema. Tokiems asmenims formuojamas gyventojų vežimas, t.y. Nosies gleivinė tampa nuolatine stafilokokų buveine, kurioje mikroorganizmai intensyviai dauginasi ir didžiulėmis dozėmis patenka į aplinką. IN gydymo įstaigos jų šaltinis – pacientai, kuriems yra atviri pūlingi-uždegiminiai procesai (infekcija perduodama kontaktiniu būdu). Tai palengvina ilgas stafilokokų išgyvenimas ant aplinkinių objektų.

Jie gerai toleruoja džiūvimą, pigmentas apsaugo juos nuo žalingo saulės spindulių poveikio (tiesioginio saulės spinduliai jie nužudomi tik po kelių valandų). Kambario temperatūroje jie išlieka gyvybingi ant pacientų priežiūros priemonių 35–50 dienų, o ant kietos įrangos – dešimtis dienų. Verdant jie akimirksniu žūva, jautrūs dezinfekcinėms medžiagoms, briliantinei žalumai, todėl ją galima plačiai naudoti paviršinių uždegiminių odos ligų gydymui.

Žmogaus ligų patogenezė. Gali užkrėsti bet kokius žmogaus kūno audinius. Tai vietiniai pūlingi-uždegiminiai procesai (verda, karbunkulai, žaizdos pūlinys, bronchitas, pneumonija, vidurinės ausies uždegimas, tonzilitas, konjunktyvitas, meningitas, endokarditas, enterokolitas, apsinuodijimas maistu, osteomielitas). Bet kokios formos vietinio proceso atsiradimas baigiasi sepsiu arba septikopemija. Žmonės, turintys imunodeficito, dažniau suserga stafilokokinėmis infekcijomis.

Imunitetas. Suaugusieji yra atsparūs, nes... turi natūralius apsauginius mechanizmus ir specifinius antikūnus, kurie įgyjami visą gyvenimą kontaktuojant su ligoniais ir nešiotojais. Stafilokokinės infekcijos procese atsiranda organizmo jautrinimas.

Imunitetui formuotis svarbūs tiek antimikrobiniai, tiek antitoksiniai, tiek antifermentiniai antikūnai. Apsaugos laipsnį lemia jų titras ir veikimo vieta. Didelis vaidmuo sekrecinis IgA vaidina svarbų vaidmenį, užtikrindamas vietinį gleivinės imunitetą. Suaugusiųjų ir vaikų, sergančių sunkiomis stafilokokinėmis infekcijomis: endokarditu, osteomielitu, sepsiu, kraujo serume aptinkami antikūnai prieš teiko rūgštis.

Laboratorinė diagnostika. Medžiaga (pūliai) atliekama bakterioskopija ir inokuliuojama į maistinę terpę. Bakteriologiniu metodu tiriamas kraujas, skrepliai, išmatos. Išskyrus grynąją kultūrą, rūšis nustatoma pagal daugybę savybių. S.aureus išskyrimo atveju nustatoma plazmakoagulazė, hemolizinas ir A-baltymas.

Serodiagnostika: RP (alfa toksinas), RNGA, ELISA.

Siekiant nustatyti infekcijos šaltinį ir plitimo kelius, izoliuotos kultūros fagotipuojamos. Laboratorinė analizė tikrai apima izoliuotos kultūros ar kultūrų jautrumo antibiotikams nustatymą.

Prevencija ir gydymas. Prevencija skirta S.aureus nešiotojams nustatyti, daugiausia tarp personalo gydymo įstaigos, jų reabilitacijos tikslais. Ypatingas dėmesys skiriamas naujagimių stafilokokinių infekcijų profilaktikai.

Ūminėms stafilokokinėms ligoms gydyti skiriami antibiotikai, kurių pasirinkimą lemia izoliuotos kultūros jautrumas vaistų rinkiniui. Sergant septiniais procesais, skiriamas antistafilokokinis imunoglobulinas arba antistafilokokinė plazma. Lėtinėms stafilokokinėms infekcijoms gydyti (chroniosepsis, furunkuliozė ir kt.) naudojamas stafilokokinis toksoidas ir autovakcina, skatinanti antitoksinių ir antimikrobinių antikūnų sintezę.

Daug bakterinės infekcijos nutekėjimas paslėptas ir ištrintas klinikinis vaizdas , todėl tyrimai yra būtina tokių ligų nustatymo dalis. Epidemiologiniu požiūriu gabenimas yra esminis infekcijos plitimo veiksnys, svarbu ją laiku diagnozuoti ir užkirsti kelią infekcijai. Ypač pavojingi medicinos ir vaikų priežiūros įstaigų, gimdymo namų, maitinimo, naujagimių skyrių darbuotojai. Viena iš tokių bakterijų yra stafilokokas. Šiame straipsnyje apžvelgsime, kaip ir kur išsitirti dėl stafilokoko ir ko tam reikia.

Pagrindinis stafilokokų diagnozavimo metodas yra bakteriologinė kultūra suskirstyti į auginimo terpę, nustatant mikroorganizmo jautrumą antibiotikams.

Kraujo tyrimas dėl stafilokokų atliekamas metodu, kuriuo serume nustatomi antikūnai prieš bakterinį antigeną. Naudojama pasyvi hemagliutinacijos reakcija ir susietas imunosorbentas tyrimas. Vieną kartą serologiniai tyrimai kraujas netiria stafilokokų diagnostinė vertė. Tiriant suporuotus serumus po 7-10 dienų svarbu padidinti antikūnų titrą. Antikūnų nustatymas naudojamas esant pūlingiems-septiniams procesams, kuriuos išprovokuoja Staphylococcus aureus (sepsis, celiulitas, pūliniai, furunkulinės ligos, apsinuodijimai, peritonitas, tonzilitas).

Taip pat kraujyje yra stafilokoko PGR, kuris nustato ligos sukėlėjo DNR.

Serologiniai tyrimai ir PGR papildo bakteriologinius tyrimus.

Informacija apie patogenus

Stafilokokas yra sferinė gramteigiama bakterija, nejudrus, fakultatyvus anaerobinis, išsidėstęs tepinėlyje „vynuogių kekių“ pavidalu ir turintis fermentą katalazę. Yra iki 30 šios bakterijos rūšių. Gali apsigyventi gleivinėse ir odoje nepadarydamas žalos, tačiau yra rūšių, kurios yra itin pavojingos sveikatai ir gali sukelti uždegiminės ligos. Yra trys pagrindiniai patogeninių mikroorganizmų tipai:

  • saprofitinis stafilokokas (S.saprophyticus). Dažniau stebimas moterims nei vyrams. Gyvena šlapimo ir reprodukcinės sistemose. Gali sukelti uretritą ir cistitą.
  • Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis). Įsikūręs ant odos, paprastai gali būti nedideli kiekiai. Pažeidimo atveju oda ir sumažėjęs imunitetas prasiskverbia į kraują, sukeldamas patologiniai procesai pavyzdžiui: endokarditas, sepsis, konjunktyvitas, žaizdų infekcija ir šlapimo takų. Pirmosios dvi rūšys ilgą laiką buvo laikomos nepatogeniškomis, nes jos yra neigiamos koaguliazės, tačiau tada šis požiūris buvo paneigtas.
  • Staphylococcus aureus (S. aureus). Tai patogeniškiausia iš trijų rūšių. Gali sukelti įvairių ligų pasireiškiantis lokalizuotomis ir apibendrintomis formomis su pažeidimais įvairių organų ir oda. Gamina karotinoidinį pigmentą ir išskiria A ir B tipo enterotoksinus.
Staphylococcus aureus yra itin stabilus aplinkoje, tiesioginius saulės spindulius gali atlaikyti iki 12 valandų, 150 laipsnių temperatūrą – dešimt minučių, nebijo vandenilio peroksido, etilo alkoholis ir natrio chloridas.

Bakterijų perdavimas vyksta įvairiais būdais:

  1. oru (kalbant, čiaudint, kosint);
  2. kontaktas ir buitis (rankos, apatiniai, priežiūros reikmenys, tvarsčiai);
  3. maistas (maistas, pienas);
  4. endogeninis (su imunodeficitu);
  5. parenterinis (medicininėms procedūroms).
Infekcijos šaltinis yra sergančių ir „sveikų“ bakterijų nešiotojų.

Žiūrėkite vaizdo įrašą šia tema

Indikacijos

  1. įtarimas dėl infekcijos ar bakterijų pernešimo.
  2. reguliariai suplanuotas Medicininė apžiūra medicinos personalas ir maitinimo darbuotojai (gimdymo namų darbuotojai tikrinami kartą per šešis mėnesius, chirurginiai skyriai 1 kartą per ketvirtį).
  3. apžiūra prieš hospitalizavimą (siekiant išvengti hospitalinių infekcijų).
  4. nėštumas.
  5. profilaktinė apžiūra.
  6. nespecifinės infekcinio pobūdžio uždegiminės ligos.
Didžiausia rizika užsikrėsti naujagimiams, pagyvenusiems žmonėms ir kūdikiams.

Taip pat gresia pavojus asmenims, sergantiems imunodeficitu(ŽIV infekcija), narkomanams, žmonėms, sergantiems ūminiu virusinės ligos(gripas, hepatitas), cukrinis diabetas, onkologinės ligos nudegusiems ir sužalotiems, gydomiems kortikosteroidais ir citostatikais, hemodializuojamiems pacientams.

Kaip išsitirti

Serologiniams tyrimams jie imasi veninio kraujo iš alkūnės srities į mėgintuvėlį su geliu, kuriame yra krešėjimo aktyvatorius. Tada laboratorijoje jis centrifuguojamas, kad būtų atskirtas serumas, kuris vėliau tiriamas, ar nėra antikūnų. Kraują duokite tik ryte, tuščiu skrandžiu.

Dėl polimerazės grandininė reakcija Veninis kraujas paimamas į mėgintuvėlį su antikoaguliantu ir tiriamas didinant nukleino rūgšties koncentraciją pakartotinai kopijuojant DNR atkarpą.

Dėl bakteriologinė analizė Paprastai tepinėlis paimamas iš gerklės ir nosies.

Gali būti naudojamos ir kitos biologinės medžiagos: skrepliai, Motinos pienas, šlapimas, išmatos, medžiaga su žaizdos paviršius, urogenitalinis tepinėlis.

Ryte paimamas tamponas iš gerklės ir nosies, vienas sterilus vatos tamponas paimamas pirmiausia iš nosies, kitas iš gerklės, tada dedamas į mėgintuvėlius su transportavimo tirpalu.

Stafilokokai yra gerai žinomi kaip žmonių ir gyvūnų pūlingų-septinių infekcijų sukėlėjai. Kartu su šeimos nariais Enterobakterijos jie užima pirmaujančią vietą etiologijoje pūlingos ligos. Genus Stafilokokas apima 35 įvairių tipų. Priklausomai nuo jų gebėjimo gaminti koagulazę, fermentą, sukeliantį kraujo plazmos krešėjimą, jie skirstomi į dvi grupes: koagulazės teigiamus ir koaguliazės neigiamus. Stafilokokų buveinė yra žmonės ir šiltakraujai gyvūnai, išorinė aplinka. Lokalizacija žmonėms - oda ir gleivinės, dvitaškis. Stafilokokinės infekcijos šaltinis yra sergantis žmogus arba sveikas nešiotojas. Perdavimo būdai: oro lašeliai, oro dulkės, kontaktas, maistas. Jautrumas infekcijai priklauso nuo bendra būklė kūnas ir amžius. Vaikai, ypač naujagimiai ir kūdikiai, yra jautriausi. Paprastai stafilokokų gebėjimas įsiveržti ir šeimininko atsparumas yra gerai subalansuoti, todėl infekcija neišsivysto tol, kol nesusidaro situacija, kai susiduriama su labai virulentišku ar sumažėjusio atsparumo makroorganizmu.

Žymiausias koagulazei teigiamų stafilokokų atstovas yra S. aureus (Staphylococcus aureus). Jis pasireiškia priekiniuose nosies kanaluose 20–40% sveikų suaugusiųjų. Maždaug 1/3 gyventojų jis nuolat išleidžiamas iš nosies, 1/3 turi trumpalaikį vežimą, o 1/3 yra laisvas nuo vežimo. S.aureus dažniausiai išskiriamas esant pūlingai patologijai ir sukelia daugybę ligų: folikulitą, furunkulą ir karbunkulą, hidradenitą, mastitą, žaizdų infekcijas, bakteremiją ir endokarditą, meningitą, perikarditą, plaučių infekcijas, osteomielitą ir artritą, pūlingą miozitą, apsinuodijimą maistu. , toksinio šoko sindromas. Minėtas ligas sukelia patogeniškumo veiksniai: kapsuliniai polisacharidai, peptidoglikanai ir teikhoinės rūgštys, baltymas A, fermentai, hemolizinai, toksinai (eksfoliaciniai, enterotoksinai nuo A iki E, H ir I), superantigenas, priklausantis enterotoksinui (TSST-1). ), sukeliantis toksinio šoko sindromą.

Visi kiti koagulazei teigiami stafilokokai daugiausia išskiriami iš gyvūnų, retai – iš žmonių, tačiau kai kuriais atvejais gali sukelti pūlingas-uždegimines žmonių ligas.

Tarp koagulazės neigiamų stafilokokų jie yra reikšmingiausi žmogaus patologijoje S. epidermidis Ir S. saprophyticus. Jie gali sukelti šlapimo takų infekcijas, osteomielitą, bakteriemiją, naujagimių infekcijas palatose. intensyvi priežiūra, akių ligos, odos infekcijos, pažeisti širdies vožtuvus, sukelti pūlingas uždegimas atliekant širdies vožtuvų keitimo dirbtiniais operacijas, atliekant organų šuntavimo operacijas, naudojant intraveninius kateterius, hemodializės kateterius, taip pat atliekant angioplastiką.

Šiuo metu genties mikroorganizmai Stafilokokas vaidina pagrindinį vaidmenį tarp hospitalinių infekcijų patogenų. Iki tam tikro laiko penicilinas buvo pagrindinis pasirinktas vaistas gydant sunkias ligas pūlingos infekcijos paskambino S. aureus. Tada pradėjo atsirasti šiam antibiotikui atsparių padermių. Paaiškėjo, kad atsparumą penicilinui lėmė fermento laktamazės, naikinančios penicilino molekulėje esantį β-laktaminį žiedą, gamyba. Šiuo metu apie 80% išskirtų padermių S. aureus sintetina β-laktamazę. Vietoj penicilino, išskiriant penicilinui atsparias padermes, naudojami pusiau sintetiniai penicilinai, atsparūs β-laktamazei. Tačiau nuo devintojo dešimtmečio padermės pradeda išsiskirti S. aureus atsparūs šios grupės antibiotikams, ypač oksacilinui ir meticilinui. Tokių padermių atsparumas yra susijęs su peniciliną surišančio baltymo (PBP 2a) gamyba, kurio sintezė savo ruožtu yra susijusi su mecA chromosomų geno įsigijimu stafilokokais. Padermės S. aureus Tie, kurie turi šį geną, yra atsparūs visiems β-laktaminiams antibiotikams, įskaitant cefalosporinus. S. aureus su minėtu atsparumo mechanizmu priskiriamas meticilinui atsparių padermių terminas. Kai kuriais atvejais atsparumą pusiau sintetiniams penicilinams gali lemti perteklinė β-laktamazių gamyba. Šiuo atveju atsparumas pusiau sintetiniams penicilinams, nustatytas laboratorinėmis sąlygomis, apibūdinamas kaip vidutinis. Meticilinui atsparios padermės S. aureus dažnai pasireiškia atsparumu kitiems antibiotikams, ypač eritromicinui ir klindamicinui. Dėl jų pasiskirstymo daugelyje užsienio šalys Vankomicinas ir teikoplaninas pradedami naudoti kaip pasirenkami antibiotikai. Tačiau jau 1996 m. pasirodė pirmieji pranešimai apie padermių išskyrimą S. aureus vidutinio atsparumo vankomicinui (MIK=8 μg/ml.), o nuo 2002 m. – didelio atsparumo padermes (MIK>32 μg/ml.). Meticilinui atsparių padermių taip pat aptinkama tarp S.epidermidis, o vankomicetams atsparių padermių. S. haemolyticus.

Pūlingoms-septinėms stafilokokų sukeltoms infekcijoms gydyti šiuo metu plačiai naudojami terapiniai bakteriofagai – tiek monofagai, tiek kombinuoti, turintys fagų rases, kurios lizuoja kelių tipų patogenų ląsteles. Skirtingai nei antibiotikai, jie neslopina normalios žmogaus simbiotinės mikrofloros augimo ir nesukelia disbiozės. Tačiau reikia nepamiršti, kad fagai taip pat sukelia stafilokokų atsparumo vystymąsi, todėl prieš juos vartojant, taip pat prieš vartojant antibiotikus, būtina patikrinti atskirų stafilokokų padermių jautrumą jiems.

Indikacijos tyrimui. Pūlinės-septinės infekcijos požymiai, medicinos personalo patikrinimas dėl vežimo.

Medžiaga tyrimams. Kraujas, CSF, pūliai, žaizdos išskyros, motinos pienas, nosies tamponai; paraudimas c Medicininė įranga ir inventorius.

Etiologinė laboratorinė diagnostika apima patogeno išskyrimas maistinėse terpėse, jo DNR nustatymas.

Lyginamosios metodų charakteristikos laboratorinė diagnostika, indikacijos naudoti įvairius laboratorinius tyrimus. Patogeno išskyrimo technika dabar yra gerai žinoma. Mikroorganizmai yra gana atsparūs aplinkos veiksniams, todėl jei pasirinktos biologinės medžiagos negalima iš karto panaudoti tyrimams, galima naudoti specialius konteinerius ir transportavimo priemones. Daugiau informacijos apie biologinės medžiagos rinkimo ir transportavimo technologiją į klinikinė ir diagnostinė laboratorija aprašyta skyriuje ikianalitiniai tyrimo etapai. Paprastai ligos sukėlėjui išskirti pakanka 3–4 dienų. Išimtis yra stafilokokų išskyrimas iš kraujo. Šiuo atveju technikos sėkmė labai priklausys nuo teisingas pasirinkimas kraujo mėginių ėmimo laikas ir antibakterinių vaistų buvimas pacientų kraujyje.

Konkretaus DNR fragmento identifikavimas S. aureus, S. epidermidis, S. haemolyticus, S. saprophyticus PGR metodas atliekami tiriant įvairias biologines medžiagas. DNR aptikimo PGR metodu rezultatai turi kokybinį ir kiekybinį formatą. Galima vienu metu aptikti ir kiekybinis įvertinimas DNR atsparus meticilinui S. aureus ir meticilinui atsparūs koagulazei neigiami stafilokokai. Šis tyrimas yra paprastas ir atkuriamas, o tai leidžia optimizuoti meticilinui atsparių padermių plitimo epidemiologinę priežiūrą, žymiai sumažinant tyrimo laiką ir darbo intensyvumą. Tačiau identifikuojant konkretų DNR fragmentą S. aureus, S. epidermidis, S. haemolyticus, S. saprophyticus PGR metodas neleidžia identifikuoti gyvybingų mikroorganizmų ar nustatyti jų jautrumo antibiotikams.

Laboratorinių tyrimų rezultatų interpretavimo ypatumai. Tiriant sterilią biologinę medžiagą (kraują, CSF), nustatoma S. aureus bet kokioje koncentracijoje. Nesterilioje biologinėje medžiagoje tik didelės koncentracijos turi klinikinę reikšmę S. aureus o tai reiškia pagrindinį jo vaidmenį uždegiminiame procese.

. MUK 4.2.1890-04 gairės „Mikroorganizmų jautrumo antibakteriniams vaistams nustatymas“.

Pagrindinės epidemijos padermės ir klonai MRSA

Apribojimų rezultatai pateikti (34).

Gruntų rinkiniai tipo identifikavimui SCC mec

Nustatomas elemento tipas

Pradžios pavadinimas

Nukleotidų seka

Amplikono dydis n.p.

CCr I tipas

5¢ -ATT GCC TTG ATA ATA GCC I

TCT-3¢

5 ¢ -AAC STA TAT CAT CAA TCA GTA CGT-3 ¢

CCr II tipo

1000

5¢ -TAA AGG CAT CAATGC ASA AAC ACT-3

CCr III tipas

1600

5¢ -AGC TCA AAA GCA AGC AAT AGA AT-3 ¢

A klasė tes

Genų kompleksas tes

5¢ – CAA GTG AAT TGA AAC CGC CT-3¢

5¢ – CAA AAG GAC TGG ACT GGA GTC

CAAA-3¢

B klasė tes(IS272 - mec A)

5¢ -AAC GCC ACT CAT AAC ATA AGG AA-3 ¢

2000

5¢ -TAT ACC AA CCC GAC AAC-3 ¢

IVa potipis

5¢ – TTT GAA TGC CCT CCA TGA ATA AAA T-3¢

5¢ -AGA AAA GAT AGA AGT TCG AAA GA-3 ¢

IVb potipis

5 ¢ – AGT ACA TTT TAT CTT TGC GTA-3 ¢

1000

5¢ – AGT CAC TTC AAT ACG AGA AAG

TA-3¢

5.2.5.3. Genų, lemiančių enterotoksinų A(sea), B(seb), C(sec) ir toksinio šoko sindromo toksino (tst-H) sintezę, nustatymas

Norėdami nustatyti genusjūra, seb, seknaudojama daugkartinė PGR.

Reakcijos mišinio sudėtis yra standartinė. Pradmenų koncentracija genų aptikimuijūra- 15 pkm/µl, seb, sek- 30 pkm/µl.

Norėdami nustatyti geną tst – MgCl 2 H koncentracija reakcijos mišinyje - 2,0 mM, pradmenų koncentracija - 12 pkm/μl.

Stiprinimo režimas Nr.1

Pradmenų rinkiniai genų identifikavimuijūra, seb, sek

Oligonukleotidų seka (5¢–3¢)

Lokalizacija geno viduje

Dydis sustiprintas produktas

GGTTATCAATGTTGCGGGGTGG

349 - 368

CGGCACTTTTTTCCTTCGG

431 - 450

GTATGGTGGTGTAACTGAGC

666 - 685

CCAAATAGTGACGAGTTAGG

810 - 829

AGATGAAGTAGTTGATGTGTAT

432 - 455

CACACTTTTAGAATCAACCG

863 - 882

ACCCCTGTTCCCTTATCAATC

88 - 107

TTTTCAGTATTTGTAACGCC

394 - 413

. MRSA sukeltų hospitalinių infekcijų epidemiologinės priežiūros organizavimas

MRSA stebėjimasyra neatskiriama hospitalinių infekcijų epidemiologinės priežiūros dalis ir apima šiuos komponentus:

Visų MRSA sukeltų hospitalinių infekcijų atvejų nustatymas, registravimas ir registravimasir patvirtinta mikrobiologinių tyrimų rezultatais;

Kolonizuotų pacientų identifikavimas MRSA (pagal epidemijos indikacijas);

Izoliatų atsparumo spektro nustatymas MRSA antibiotikams, antiseptikams, dezinfekavimo priemonėms ir jautrumui bakteriofagams;

Medicinos personalo sveikatos būklės stebėjimas (epidemijiškai reikšmingų padermių nešiojimas, sergamumas);

Sanitarinis ir bakteriologinis objektų tyrimas aplinką dėl prieinamumo MRSA;

Molekulinės genetinės stebėsenos vykdymas, kurio tikslas – gauti duomenis apie ligoninės izoliatų sandarą, identifikuoti epidemiškai reikšmingus iš jų, taip pat iššifruoti jų cirkuliacijos ir plitimo ligoninėje mechanizmus;

Stebėti, kaip laikomasi sanitarinių, higienos ir antiepideminių režimų;

Epidemiologinė sergamumo ir mirtingumo nuo hospitalinių infekcijų analizė, leidžianti daryti išvadas apie užsikrėtimo šaltinius, būdus ir veiksnius bei sąlygas, palankias infekcijai.

Pagrindinė epidemiologinės analizės grandis turėtų būti molekulinė genetinė stebėsena. Jos duomenimis pagrįsta epidemiologinė analizė leis ne tik teisingai įvertinti, bet ir numatyti epidemines situacijas, o ankstyvomis kovos su epidemijomis priemonėmis užkirsti kelią MRSA sukeliamų hospitalinių infekcijų protrūkiams..

Organizacinis ir metodinis darbo, skirto hospitalinių infekcijų sukeltų infekcijų prevencijai ir kontrolei, valdymas MRSA , vykdyti struktūriniai vienetaiįstaigos ir institucijos, vykdančios valstybinę sanitarinę ir epidemiologinę priežiūrą respublikose, teritorijose, rajonuose, rajonuose ir miestuose. Maskva ir Sankt Peterburgas.

Federalinės vykdomosios valdžios institucijos, įskaitant sveikatos priežiūros institucijas, dalyvauja įgyvendinant priemonių kompleksą, skirtą užkirsti kelią hospitalinėms infekcijoms, įskaitant. sukelta MRSA.

Panašūs straipsniai