MOKSLO METODAI

Fenogeografijos metodai Pagrindinis fenogeografijos metodas yra fenologinių telkinių palyginimas. Tai galima padaryti dviem būdais – žemėlapyje ir be jo. Abiem atvejais analizė atliekama dviem būdais: vienu plaukų džiovintuvu arba vienu plaukų džiovintuvų kompleksu. Dažnai derinamas su vienu plaukų džiovintuvu

13 skyrius. Spermos karas: ko negali pasakyti paleontologijos atradimai. Niekas arba beveik nieko gyvūnų dauginimosi srityje yra prasmingas, nebent reprodukciją nagrinėtume spermos konkurencijos šviesoje. Profesoriaus Timo Birkheado Robino Bakerio prieštaringai vertinama knyga „Karai“

11.2. Psichogenetikos metodai Kadangi klasikinės genetikos metodai dažniausiai nepritaikomi žmonių tyrimams, psichogenetika sukūrė savo metodus.Genealoginis metodas. Metodas tirti šeimas ir analizuoti jų kilmės dokumentus. Kuo daugiau kartų ji apima

SIA "Dzīvnieku veselības centrs"

veterinarijos gydytojas Marina Khitrova

Dirbtinio apvaisinimo metu šunims sperma suleidžiama į kalės reprodukcinį traktą naudojant specialius prietaisus. Apvaisinimo būdas priklauso ir nuo to, kaip paruošiama sperma.

Visiškai natūralu, kad šis metodas taikomas tik veisiant grynaveislius gyvūnus, o atsakingi ir patyrę veisėjai kruopščiai atrenka veisimui tinkamus individus. Yra daug situacijų, kai šis metodas geriausiai tinka konkrečiam tikslui pasiekti. Pažvelkime į kai kurias situacijas, kuriose šis metodas gali būti naudojamas.

• Gyvūnai yra toli vienas nuo kito, viduje skirtingos salys. Pasiruošimas kelionei, bilietų pirkimas paskutinę minutę, nes kelionės datą nulemia kalytės pasirengimas kergimui, viešbučio, kuriame būtų leidžiamas šuo, paieška... Tai didžiulės išlaidos ir stresas ne tik ne tik šeimininkams, bet ir gyvūnui. Gyvūnas, dažnai kaip siuntinys, siunčiamas šuns šeimininkams, o kalytės šeimininkas nežinos, kokiomis sąlygomis ir kaip viskas įvyko. O jei pagalvoji, ką gyvūnas išgyvena tokiose situacijose, kaip jam baisu ir vienišas būti toli nuo namų?! Be to, skrydžiai, stresas ir ilgos kelionės gali blokuoti ovuliacijos procesą, sumažės progesterono lygis ir poravimasis bus beprasmis.
• Kita situacija, kai gyvūnai nepritaria jūsų pasirinkimui, demonstruoja agresiją vienas kito atžvilgiu ir poravimasis yra labai problemiškas.
• Būna situacijų, kai dėl anatominių priežasčių poruotis tampa sunku. Pavyzdžiui, gyvūnai labai skiriasi vienas nuo kito dydžiu arba dėl sužalojimo ar raumenų ir kaulų sistemos problemų šuo patinai negali užlipti ar apsisukti.
• Dažnai prieš poravimąsi būtina patikrinti spermos kokybę ir dirbtinis apvaisinimas yra geriausias pasirinkimas.
• Dirbtinis apvaisinimas visiškai apsaugo šunį nuo lytiniu keliu plintančių infekcijų

KELETAS FAKTŲ APIE KALŲ REPRODUKTINIO TAKO ANATOMIKĄ

• Išoriškai kalių reprodukcinis traktas susideda iš vulvos (kilpos), susidedančios iš lytinių lūpų,
• Toliau ant apatinės sienelės yra klitoris ir klitorio duobė.
• Išoriniai lytiniai organai susilieja į prieangį (vestibulumą) – tuščiavidurį, vamzdelį panašų organą lygiomis sienelėmis, kurios siaurėja ties siena su makštimi.
• Ant sienos tarp prieangio ir makšties, ant apatinės sienelės, yra šlaplė.
• Toliau prasideda makštis – labai ilgas tuščiaviduris raumeninis vamzdelis su išilginėmis raukšlėmis, kurios rujos metu padidėja daug kartų. Didelėms kalėms makšties ilgis gali siekti 30-40 cm! Todėl neįmanoma pamatyti gimdos kaklelio ir tiesiog ką nors įkišti į gimdą! Priekinė makšties dalis yra labai siaura ir tik labai plonas instrumentas gali pasiekti gimdos kaklelį.
• Makštis baigiasi makšties skliautu (fornix vaginae)
• Kitas ateina gimdos kaklelis (gimdos kaklelis). Šunims gana sunku prasiskverbti į gimdos kaklelį, nes jis yra ant makšties „lubų“, o gimdos kaklelio kanalo anga nukreipta žemyn.
• Po gimdos kaklelio ateina gimda (gimda), kaip ir gimdos kūnas - trumpas segmentas, padalintas į dešinįjį ir kairįjį gimdos ragus. Gimdos ragai eina link dešiniojo ir kairiojo inksto, kur jie patenka į labai plonus gimdos (kiaušintakių) vamzdelius. Gimdos ragų galuose yra kiaušidės.
• Kiaušidės yra lytinės liaukos, išskiriančios įvairius lytinius hormonus, iš kurių pagrindiniai yra progesteronas ir estrogenai. Kiaušidėse yra folikulų – pūslelių, kurių kiekvienoje yra po vieną kiaušinėlį. Rujos metu subręsta grupė folikulų, jie labai padidėja ir tam tikru momentu sprogsta – įvyksta ovuliacija.

KAD GAUTI GERĄ DIRBTINIO SĖDINIMO REZULTATĄ, REIKIA:

• tinkamai paruošta geros kokybės sperma;
• teisingas kalės vaisingo laikotarpio nustatymas;
• geras kalės vaisingumas (vaisingumas);
• teisinga apvaisinimo technika;
• teisingas medžiagų pasirinkimas.

SPERMOS RŪŠYS, SKIRTAS DIRBTINIAME SĖDINIMUI

Dirbtiniam apvaisinimui naudojama sperma gali būti:

• šviežios (šviežios sėklos);
• atšaldyta sperma;
• šaldyta (užšaldyta sperma).

SĖKLINIMAS ŠVIEŽIA SPERMA

Šviežia sperma– Tai šviežiai gautas produktas, kurio nereikia specialiai ruošti ar vėsinti.

Tokie kalės dauginimosi trakte esantys spermatozoidai turi didžiausią gyvybingumą ir, kaip žinia, geros kokybės sperma išlaiko savo kokybę iki 7 dienų. Vienintelis dalykas yra tai, kad tokia sperma turi būti naudojama iškart po surinkimo, jos negalima laikyti.

Šviežia sperma gali būti naudojama visų rūšių sėklinimui.

• Intravaginalinis– kai sperma įvedama į priekinę makšties dalį naudojant ilgą kateterį. Intravaginaliniam AI reikalingas didesnis spermos tūris, 3-10 ml, priklausomai nuo šuns dydžio

Įvedus spermą į makštį, kalytė 10 minučių pakeliama už užpakalinių kojų + pageidautinas makšties skliauto masažas.

• Intrauterinis apvaisinimas– spermos suleidimas tiesiai į gimdos ertmę. Tam naudojamas skandinaviškas zondas, kurį sudaro plastikinis kreiptuvas ir metalinis kateteris, taip pat platus pritaikymas gavo endoskopinis metodas kai naudojant specialų endoskopinį zondą į gimdą įvedamas plonas kateteris. Reikalingas spermos kiekis yra labai mažas, tik 1-3 ml.

Naudojant šiuos metodus nereikia naudoti bendrosios anestezijos. Kartais, jei šuo per daug neramus, galima naudoti lengvą sedaciją.

• Intrauterinis apvaisinimas operacijos metu- Atidarius pilvo ertmę, chirurgas izoliuoja gimdą ir per intraveninį kateterį suleidžia spermą tiesiai į gimdą.

Naudojant chirurginį metodą, reikia turėti omenyje:

• etinis aspektas;
• tai invazinis metodas;
• reikalinga bendroji nejautra, rizika;
• galimas tik 1 IO;
• pooperacinių komplikacijų tikimybė.

SĖKLINIMAS ATŠALSTA SPERMA

Atšaldyta sperma– tai specialiai paruoštas produktas, atvėsintas iki +4 °C temperatūros. Tokių spermatozoidų laikymo trukmė yra nuo kelių dienų iki savaitės ir priklausys tiek nuo vyriškos lyties spermos kokybės, tiek nuo naudojamų tirpiklių – ilgintuvų. Galima naudoti tik šunims skirtus ilgintuvus. Tokia sperma ruošiama tam tikru būdu. Naudojama tik spermatozoidų turtinga spermos dalis, kurioje nėra prostatos skysčio. Dažnai spermatozoidai turi būti centrifuguojami, kad atskirtų prostatos skystį. Tada lašas po lašo pilamas plėstuvas, o svarbu stebėti, kad nebūtų temperatūrų skirtumo, tada paruošta sperma lėtai atšaldoma iki +4 °C. Tokia sperma paruošiama transportavimui. Naudojami specialūs konteineriai su aušinimo elementais. Pavyzdžiui, „Minitube“ konteineriai gali užtikrinti reikiamą temperatūrą 48 valandas.

Visos medžiagos, naudojamos spermai surinkti ir paruošti, turi būti nespermicidinės!
Sėklinant atšaldyta sperma gali būti naudojami visi apvaisinimo būdai, tačiau reikia atsižvelgti į tai, kad tokie spermatozoidai nebėra tokio gyvybingumo kaip šviežiai, dauginimosi trakte išgyvena apie 24 - 72 valandas, todėl reikia nustatyti. yra būtinas palankus laikotarpis poravimuisi, tai yra ovuliacijos momento nustatymui.

UŽŠALDYTOS SPERMOS SĖKLINIMAS

Tokie spermatozoidai gali būti laikomi daug metų spermos bankuose ir laikomi specialiose talpyklose su skystu azotu – 196°C temperatūroje.

Tokios spermos siuntimas yra gana brangus ir reikalauja skysto azoto transportavimo konteinerio, vadinamojo sausojo siuntėjo.

Svarbu, kad priimančioji šalis taip pat turėtų konteinerius spermai laikyti (spermos banką), nes transportavimo konteineriai gali palaikyti žemą temperatūrą tik keletą dienų. Po atšildymo tokių spermatozoidų gyvybingumas gerokai mažesnis – reprodukciniame trakte jis išgyvena tik iki 12 valandų! Po atitirpinimo turite jį naudoti nedelsiant!
Todėl reikia tiksliai nustatyti ovuliacijos momentą ir sperma suleidžiama pačiu palankiausiu momentu.
Naudojama tik intrauterinė spermos injekcija!

SPERMOS REIKALAVIMAI:

• rekomenduojamas spermatozoidų skaičius nuo 150 -200 x 10⁶ palaipsniui judančių spermatozoidų;
• mobilumas >70 %;
• defektai< 40 %;
• pageidautina dviem IO.

KADA DARYTI KERINGIMĄ AR DIRBTINĮ SĖLINIMĄ?

• Natūralus poravimasis arba AI – dirbtinis apvaisinimas šviežia sperma:
  • jei yra 2 poravimasis, geriausia 1 ir 3 dienomis po ovuliacijos;
  • jei poruojama vieną kartą – idealiu atveju 2 ar 3 dieną po ovuliacijos;
• AI su atšaldyta arba sušaldyta sperma:
  • įvairūs protokolai;
  • Idealiu atveju 2-3 dienos po ovuliacijos.

SPERMOS SIUNTIMAS

Neretai spermos perkėlimas yra pats sunkiausias aspektas naudojant dirbtinį apvaisinimą. Norėdami siųsti spermą, galite naudoti greitojo pašto įmones, pavyzdžiui, DHL, FedEx, arba naudotis krovinių kompanijų paslaugomis. Pristatymas atliekamas per 1-2 dienas. Tik reikia nepamiršti, kad įmonės nevykdo pervežimų savaitgaliais ir atostogos. Tai yra, jei AI yra penktadienį, šeštadienį, sekmadienį arba pirmadienį, sperma turi būti išsiųsta

• ketvirtadienį – su pristatymu per 1 dieną
• Trečiadienį – su pristatymu per 2 dienas

Sperma turi būti laikoma šaldytuve ir vengti temperatūros svyravimų.

MINIMALI DOKUMENTACIJA:

• Veterinarinis sveikatos sertifikatas spermai eksportuoti
• Spermos kokybės sertifikatas
• Užšaldyta sperma: atšildymo rekomendacijos, šiaudelių skaičius vienam AI
• Šuns vardas kaip oficialiuose dokumentuose
• Dokumentų kopijų paketas

Šiose oficialiose interneto svetainėse galite susipažinti su skirtingų šalių reikalavimais spermos eksportui/importui, sužinoti, kurie veterinarai sprendžia apvaisinimo ir dauginimosi problemas įvairiose šalyse bei kitą vertingą informaciją:

www.evssar.org
www.canirep.com
www.canine-semenbanks-europe.com

IN tokiu atveju kalbame apie dirbtinį apvaisinimą, kuriam jų šeimininkai suteikė terminą „dirbtinis šunų poravimas“.
Ši technika žinoma nuo XVIII a. Tai prasidėjo dviejų italų eksperimentais. Šiek tiek vėliau praktika dirbtinis apvaisinimas buvo pristatytas Rusijoje, kur Rusijos mokslininkai toliau tyrinėjo šį metodą ir netgi kūrė spermos užšaldymo ir laikymo būdus. Tai leido XX amžiaus viduryje atlikti šuns apvaisinimo operaciją ir gauti visiškai sveikus šuniukus.

Dirbtinis šunų poravimas: kodėl tai būtina?

Šis klausimas gali kilti bet kuriam asmeniui. Tačiau daugelis veisėjų užsiima veisimu grynaveislių šunų, jau seniai vertina puikias technikos galimybes. Tai leidžia naudoti puikių savybių turinčių patinų spermą, esančią toli nuo patelės. Pavyzdžiui, kitame mieste ar šalyje.

Antruoju dirbtinio poravimosi „privalumu“ galima laikyti ligų, kurios gali būti perduodamos iš vieno individo kitam per lytinius santykius, rizikos sumažinimą iki nulio. Faktas yra tas, kad sintetiniuose spermos skiedikliuose yra antibiotikų, kurie naikina infekciją.
Be to, yra keletas požymių, kada dirbtinis šunų kergimas yra geresnis nei įprastas kergimas.

Jie apima:
· fiziologinės savybės kalytė su siaura ir trumpa makštimi;
Išorės ypatybės, kurios apsunkina poravimąsi ( sunkaus svorio, didelio dydžio ir pan.);
· neinfekcinių ligų, trukdančių poruotis šunims (galūnių ar nugaros) buvimas;
· nedraugiškas gyvūnų požiūris vienas į kitą.

Apskritai dirbtinio poravimosi technika yra nusistovėjusi ir duoda teigiamų rezultatų. Tačiau šunų savininkai turi suprasti, kad tokią procedūrą galima atlikti tik dalyvaujant aukštos kvalifikacijos specialistams, turintiems specialią įrangą ir medžiagas. Nuo to priklauso šunų ir jų palikuonių sveikata.

Ejakuliacija

Pasiekus pilną erekciją, atskiriama antroji frakcija, kurioje yra spermatozoidų (1-2 ml). Šis procesas trunka 1-2 minutes. Ejakuliacija atsiranda dėl varpos nervinių galūnėlių stimuliavimo. Sperma su prostatos liaukos sekretu išsiskiria dėl šlaplę supančių raumenų, ypač bulbokaverninių ir išmatų raumenų, susitraukimų. Paprastai šiame etape vyras sustabdo aktyvius judesius, kurie sutampa su ejakuliacijos pradžia.

Rotacija

Patinas pakelia vieną leteną ir apsisuka aplink savo ašį, užimdamas padėtį „uodega iki uodegos“ (2 pav.), o varpos galvutė lieka pradinėje padėtyje. Elastinė varpos dalis, esanti už galvos, suteikia 180 laipsnių posūkį. Apvertimas nesukelia gyvūnui diskomforto, nes varpos kaulas neleidžia užsikimšti šlaplei erekcijos ir apsisukimo metu. Remiantis esama prielaida, rotacija sukelia pagrindinės varpos venos okliuziją ir taip neleidžia nustoti erekciją. Vieni patinai nesisuka, kiti lieka montavimo pozicijoje, o tai gali sukelti kalytei tam tikrų nepatogumų, ypač jei patinas stambus; tokiais atvejais ji atsargiai pakeliama, palengvinant patelės padėtį.

Ryžiai. 2 Rotacija

Užraktas

Užrakto metu patinas dažniausiai ramiai stovi uodega prie uodegos (3 pav.). Šiame etape įvyksta trečiosios sėklinio skysčio frakcijos ejakuliacija (5-20 ml prostatos sekreto). Kartu su uodegos judesiais vyksta ritmiški tarpvietės raumenų susitraukimai.

Ryžiai. 3 Užraktas

Užraktas trunka nuo 10 iki 45 minučių, tačiau straipsnio autorius pastebėjo užraktą, kuris truko mažiausiai valandą. Kiek galima spręsti, užrakto trukmė neturi jokios įtakos poravimosi rezultatams. Apvaisinimas įvyksta ir nesant užrakto, išsiveržus antrai ejakuliato frakcijai, kurioje yra spermatozoidų, t.y. patinui baigus trūkčiojančius judesius. Yra prielaida, kad pilies nebuvimas turi įtakos vados dydžiui, tačiau, autoriaus pastebėjimais, ši nuomonė yra klaidinga.

Poravimosi metu (montuojant, supažindinant ir užrakinant) patyrusios kalės ramiai stovi. Kai kuriais atvejais kalytė gali bandyti pasitraukti, tempdama patiną su savimi. Paprastai toks elgesys nekenkia gyvūnams, tačiau protingiau yra laikyti kalę už antkaklio, kad būtų išvengta tokio bandymo.

Užrakto atleidimas

Prieš išsiskyrimą varpos galvutės erekcija atslūgsta ir partneriai išsiskiria. Paprastai patinas laižo varpą, kuris vėliau įtraukiamas į prieauglį. Jei tarp apyvarpės angos ir varpos yra kailio arba į ją patenka išorinio apyrankės sluoksnio oda, sukelianti skausmą, vyrui suteikiama pagalba. Visiškas varpos atitraukimas pasiekiamas paspaudus priedugnį 2-3 cm už angos, todėl anga atsidaro.

Po poravimosi kalytė paprastai energingai laižo makštį, pašalindama bet kokią nutekėjusią spermą. Kai kurios patelės gali rodyti potraukį, šokinėti ir žaisti arba voliotis ant žemės. Gyvūno stabdyti ar neleisti jam šlapintis nepatartina, nes užrakto metu didžioji dalis ejakuliato jau pateko į gimdą ir kiaušintakius.

Prieš atlikdamas dirbtinį apvaisinimą (AI) – iškilus galimoms problemoms poravimosi metu – tiek gyvūno savininkas, tiek veterinarijos gydytojas turi atsižvelgti į psichologinius ir fiziologinius normalaus kergimo mechanizmus. Be to, ne visi veisėjai supranta santykių psichologiją poravimosi metu. Kergimui kalytė pristatoma gamintojui, o ne atvirkščiai; šios sąlygos laikymasis yra ypač svarbus, kai kalbama apie pirmąjį jauno patino poravimąsi. Jauną patiną patartina suporuoti su patyrusia kalyte, ir atvirkščiai – nepatyrusios kalės partneriu reikėtų rinktis subrendusį patiną.

Tarp šuns ir kalės užsimezga tam tikri santykiai, atsiranda simpatija arba, atvirkščiai, priešiškumas, dėl kurio vienas iš partnerių atsisako lytinių santykių. Problemų gali sukelti ir šuns ar kalės socialinė padėtis bei dominavimo faktorius. Jaunas patinas, užimantis pavaldžias pareigas dominuojančios moters kompanijoje, patiria nedrąsumą, kuris perauga į sunkumus bandant užlipti ar prisirišus. Dominuojanti kalytė net rujos metu gali nuslopinti tokį partnerį, priversdama jį atsisakyti poravimosi, tačiau noriai poruosis su dominuojančią padėtį užimančiu patinu. Kadangi yra problemų, kurių priežastys neapsiriboja fiziologija, naudinga atsižvelgti į kai kuriuos psichologinius veiksnius.

Dažnai artėjančios rujos požymiai pastebimi likus kelioms savaitėms iki rujos pradžios. Kalytė flirtuoja arba sėdi ant kitų šunų – ir patinų, ir pateles. Jos apetitas mažėja arba, priešingai, didėja, ji pradeda dažniau šlapintis, rodo nepaklusnumą, blogiau elgiasi treniruotėse. Patyrusiam veisėjui toks elgesys yra signalas, kad artėja karštis.

Proestrus laikotarpiu kalytės pomėgis bendrauti su kitais šunimis didėja. Tačiau ji pasyviai reaguoja į šuns patino artėjimą ir gali net įkąsti bei išvaryti jį, jei jis bandys ją apuostyti. Proestrus pabaigoje elgesys pasikeičia. Kalytė tampa žaisminga, imasi iniciatyvos bendraudama su patinais, leidžia jiems ją pauostyti. Rujos pradžia pasižymi būdingu elgesiu, pavyzdžiui, kalytė stovi, vizgina uodegą ir judina ją į šoną. Kai kurios kalės, patino užuostytos, pakelia stuburą, parodydamos vulvą. Kai šuo patinas uždeda leteną kalei ant nugaros, ji pasilenkia (lordozė) ir gali pati su juo flirtuoti (stumti nosimi, užsidėti leteną ant nugaros, imituoti tvirtinimą), jei dėl kokių nors priežasčių jis rodo baikštumą. Poravimosi metu kalytė stovi ramiai, plačiai išskėstomis užpakalinėmis kojomis, pakeltu kryželiu, o uodega prilaikyta į šoną.

Jauni patinai demonstruoja augimą nuo labai ankstyvo amžiaus (nuo 4–5 savaičių), tai laikoma norma. Ši veikla yra svarbi šuns patinui ir yra seksualinio elgesio mokymas. Be to, kitų šunų ar negyvų daiktų kėlimas skatina brendimą. Tačiau tokį elgesį reikia ryžtingai nutraukti, jei jis nukreiptas į žmones, o ypač į vaikus.

Feromonai, esantys makšties išskyros o kalės šlapimas karštyje pritraukia patinus net per nemažą atstumą ir skatina juos sekti paskui ją. Laikant kartu, šuo patinai dažnai net atsisako maisto ir vandens, jei patelė yra karštyje. Šiuo metu geriau jį pašalinti. Kai kurie šunų patinai linkę išgirsti savo susijaudinimą ir nenuilstamai staugti visą dieną. Kiti bando pabėgti nuo šeimininkų išmušdami duris ar langą, kasdami ar peršokdami per tvorą; Į tokių bandymų slopinimą jie dažnai atsako destruktyviu elgesiu. Šunų patinams, sergantiems prostatos liaukos ligomis (pavyzdžiui, cistine hiperplazija), stebimos kraujingos išskyros iš varpos, o tai paaiškinama krauju užpildytų cistų plyšimu dėl susijaudinimo.

Patino elgesys ir pozos, kuriomis jis susitinka sutikus patelę karštyje, dažniausiai rodo žaismingą nuotaiką, mišrią su baime, pastaroji tiesiogiai priklauso nuo šuns patino socialinio statuso. Jis artinasi prie kalytės, vizgindamas uodegą, iškiša ausis ir vengia į ją atidžiai žiūrėti. Jei ji leidžia jam prieiti, patinas laižo jai ausis ir snukį, apuostęs ją ir uždeda leteną ar galvą ant nugaros. Jei kalytė nerodo draugiškumo, patinas, norėdamas užliūliuoti jos budrumą, gali pradėti žaidimą – tupi ant žemės arba kviečia kalytę pasivyti.

Susideda iš 6 etapų:

2. Patinas atlieka aktyvius judesius ir intromisija – pradinė erekcija.

3. Erekcija – varpos galvutės patinimas – pirmosios ejakuliato frakcijos atsiskyrimas (skaidri prostatos sekrecija).

4. Ejakuliacija – antrosios frakcijos (balto skysčio, kuriame yra spermatozoidų) atskyrimas – sukimasis.

5. Užraktas – spermatozoidų pažanga – trečiosios frakcijos atskyrimas (skaidri prostatos sekrecija).

6. Spynos sulaužymas ir mezgimo pabaiga.

Jei kalytė leidžia patinui prieiti (9.1 pav.), jis priekinėmis letenomis suspaudžia jos užpakalį ir atlieka būdingus judesius. Nepatyręs patinas dažniausiai kontroliuoja savo judesius, bando orientuotis penį ir nustatyti kalės vulvos vietą. Pradinė erekcija suteikia įžangą varpos kaulo pagalba. Susilietus su vulva, suaktyvėja šuns patino judesiai.

Sadka

Įkišus varpą į vulvą, šuns patino judesiai tampa aktyvesni ir energingesni. Jis žingsniuoja nuo kojos ant kojos (šoka), šiek tiek pakilęs virš kalės.

Šiame etape pasiekiama visa erekcija. Varpos galvutė pailgėja, lemputė lieka pritvirtinta prie varpos kaulo, o pars longa glandis juda į priekį per varpos kaulą. Lemputė išsipučia, užtikrindama sukibimą tarp varpos ir kalės makšties (užrakto). Karštyje kalės skleidžiami garsai ir jos kvapas skatina erekciją, kuri atsiranda dėl impulsų, sklindančių iš jaudinamųjų (dubens splanchninių) nervų, susidedančių iš parasimpatinių dubens ir kryžmens nervų skaidulų. Nerviniai impulsai užtikrina išorinių ir vidinių pudendalinių arterijų, vedančių į kaverninius varpos kūnus, išsiplėtimą; ischiouretralinių raumenų susitraukimas neleidžia nutekėti veninio kraujo. Kraujas sulaikomas svogūnėlio kaverninio audinio sinusuose, todėl jis išsipučia. Erekcijos intensyvumą palaiko sėdmenų ir bulbospongiozinių raumenų susitraukimas, taip pat vulvos susitraukimas užrakto metu. Šios fazės metu išsiskiria pirmoji ejakuliato dalis (1–2 ml skaidraus prostatos sekreto).

Pasiekus pilną erekciją, atskiriama antroji frakcija, kurioje yra spermatozoidų (1–2 ml). Šis procesas trunka 1–2 minutes. Ejakuliacija atsiranda dėl varpos nervinių galūnėlių stimuliavimo. Sperma su prostatos liaukos sekretu išsiskiria dėl šlaplę supančių raumenų, ypač bulbokaverninių ir išmatų raumenų, susitraukimų. Paprastai šiame etape vyras sustabdo aktyvius judesius, kurie sutampa su ejakuliacijos pradžia.

Patinas pakelia vieną leteną ir apsisuka aplink savo ašį, užimdamas padėtį „uodega iki uodegos“ (9.2 pav.), o varpos galvutė lieka pradinėje padėtyje. Elastinė varpos dalis, esanti už galvos, suteikia 180 laipsnių posūkį. Apvertimas nesukelia gyvūnui diskomforto, nes varpos kaulas neleidžia užsikimšti šlaplei erekcijos ir apsisukimo metu. Remiantis esama prielaida, rotacija sukelia pagrindinės varpos venos okliuziją ir taip neleidžia nustoti erekciją. Vieni patinai nesisuka, kiti lieka montavimo pozicijoje, o tai gali sukelti kalytei tam tikrų nepatogumų, ypač jei patinas stambus; tokiais atvejais ji atsargiai pakeliama, palengvinant patelės padėtį.

Rotacija

Užrakto metu patinas dažniausiai ramiai stovi pozicijoje nuo uodegos iki uodegos (9.3 pav.). Šiame etape įvyksta trečiosios sėklinio skysčio frakcijos ejakuliacija (5–20 ml prostatos sekreto). Kartu su uodegos judesiais vyksta ritmiški tarpvietės raumenų susitraukimai.

Užraktas trunka nuo 10 iki 45 minučių, tačiau straipsnio autorius pastebėjo užraktą, kuris truko mažiausiai valandą. Kiek galima spręsti, užrakto trukmė neturi jokios įtakos poravimosi rezultatams. Apvaisinimas įvyksta ir nesant užrakto, išsiveržus antrajai ejakuliato frakcijai, kurioje yra spermatozoidų, t.y., patinui baigus trūkčiojančius judesius. Yra prielaida, kad pilies nebuvimas turi įtakos vados dydžiui, tačiau, autoriaus pastebėjimais, ši nuomonė yra klaidinga.

Poravimosi metu (montuojant, supažindinant ir užrakinant) patyrusios kalės ramiai stovi. Kai kuriais atvejais kalytė gali bandyti pasitraukti, tempdama patiną su savimi. Paprastai toks elgesys nekenkia gyvūnams, tačiau protingiau yra laikyti kalę už antkaklio, kad būtų išvengta tokio bandymo.

Prieš išsiskyrimą varpos galvutės erekcija atslūgsta ir partneriai išsiskiria. Paprastai patinas laižo varpą, kuris vėliau įtraukiamas į prieauglį. Jei tarp apyvarpės angos ir varpos yra kailio arba į ją patenka išorinio apyrankės sluoksnio oda, sukelianti skausmą, vyrui suteikiama pagalba. Visiškas varpos atitraukimas pasiekiamas paspaudus priedugnį 2–3 cm už angos, todėl anga atsidaro.

Užraktas

Po poravimosi kalytė paprastai energingai laižo makštį, pašalindama bet kokią nutekėjusią spermą. Kai kurios patelės gali rodyti susijaudinimą, šokinėti ir žaisti arba voliotis ant žemės. Gyvūno stabdyti ar neleisti jam šlapintis nepatartina, nes užrakto metu didžioji dalis ejakuliato jau pateko į gimdą ir kiaušintakius.

Nepaisant to, kad kalytė leidžia šuniui užsikabinti ir leidžia užsikabinti, neteisingai pasirinkus poravimosi laiką, gali kilti sunkumų dėl didelio makšties patinimo. Vyriškis nepajėgia pakankamai giliai įkišti varpos, todėl nepavyksta pasiekti spynos. Dažnai antras bandymas kitą dieną būna gana sėkmingas. Jei gyvūnai jauni ir nepatyrę, tuomet šuniui patinui reikia padėti: palaikydami jį už krumplio, nukreipkite varpą į makštį.

Kai kurios patelės, dažniausiai ramios ir taikios, intromicijos metu gali panikuoti, tapti agresyvios patino atžvilgiu ir net bandyti įkąsti šeimininkui. Kai kuriais atvejais patartina naudoti trankviliantus arba atlikti dirbtinį apvaisinimą, nors in pastarasis atvejis Turėtumėte atsižvelgti į galiojančias Kennel Club taisykles registruojant šuniukus, gimusius dėl AI.

Makšties žiedinių raumenų susiaurėjimas, kurį sukelia mergystės plėvės rigidiškumas arba susiaurėjimas, neleidžia visiškai įsiskverbti. Mergystės plėvės išsaugojimas būdingas jaunoms patelėms; defektas pašalinamas įkišus pirštinę į makštį. Kai kuriais atvejais gali prireikti chirurginiu būdu pašalinti mergystės plėvę, tačiau rando audinio susidarymas gali sukelti problemų gimdymo metu. Dirbtinis apvaisinimas yra geriausia alternatyva makšties susiaurėjimui arba užsilikusi mergystės plėvė, jei turimas spindis leidžia įvesti atitinkamus instrumentus. Autorės patirtis rodo, kad tokio tipo makšties susiaurėjimas nesukelia distocijos gimdymo metu.

Makšties gleivinės patinimas, pastebėtas rujos stadijoje, gali sukelti pernelyg didelį patinimą ir prolapsą. Gleivinės hiperplazija neleidžia lytiniams santykiams, o dažnai ir dirbtinio apvaisinimo instrumentų įvedimui. Gydymui skiriami sutraukiantys ir dezinfekuojantys tirpalai, esant sunkiems pažeidimams, rekomenduojamas chirurginis hipertrofuoto audinio pašalinimas. Nekomplikuota makšties gleivinės hiperplazija pasibaigus rujai, kaip taisyklė, regresuoja, tačiau tokiems gyvūnams būdinga tendencija, kad kitos rujos metu liga pasikartos. Dėl šios priežasties kalės, linkusios į makšties gleivinės hiperplaziją, veisimui nenaudojamos.

Viena iš dažniausiai pasitaikančių problemų, sukeliančių sunkumų poravimosi metu, yra patino nepatyrimas. IN panašių atvejųŠuo patinai dažnai bando atlikti intromisiją išangėje arba žemiau vulvos. Jauni šunų patinai dažnai patiria pernelyg didelį stimuliavimą, dėl kurio atsiranda priešlaikinė varpos galvutės erekcija, užkertant kelią introducijai. Pradinės erekcijos stadijoje prostatos sekretas išsiskiria. Antrosios frakcijos ejakuliacija įvyksta vėliau. Būtina laikinai atskirti patiną nuo partnerio ir leisti jam nusiraminti, o po 30 minučių atlikti antrą bandymą. Nesėkmės atveju geriausias variantas yra dirbtinis apvaisinimas.

IN retais atvejais jauni šunų patinai negali atlikti lytinių santykių dėl fimozės, kurią sukelia varpos ir apyvarpės sukibimas arba apykaklės angos susiaurėjimas. Abiem atvejais būtina chirurginė intervencija.

Patino lytinio potraukio stoka gali atsirasti dėl daugelio priežasčių, tarp kurių yra priešiškumas seksualiniam partneriui, klaida renkantis poravimosi laiką, sėklidžių hipoplazija, prostatos ligos, šlapimo akmenys (retai), balanopostitas, epididimitas, slankstelių uždegimas. artrozė (dažnai randama tokių veislių šunims, kaip danų skalikas ir pekinas), apatinės stuburo dalies ligos (bokserių spondilozė) ir užpakalinių galūnių (displazija) klubų sąnarys). Norint nustatyti priežastį, atliekamas klinikinis tyrimas. Jei lytinis potraukis sumažėja dėl psichologines problemas, partnerio pakeitimas gali pagerinti situaciją. Jei susijaudinimas tęsiasi, patinas poruojasi su kita patele arba renkami spermatozoidai dirbtiniam apvaisinimui. Tais atvejais, kai nustatomos prostatos ligos, šlapimo akmenys, epididimitas ir balanopostitas, atliekamas tinkamas gydymas. Jei libido problemos aiškinamos paveldimomis ligomis, būtina su šeimininku aptarti etinę klausimo pusę ir paaiškinti, kodėl genetinių defektų turintys gyvūnai nenaudojami veisimui.

Remdamasis savo patirtimi, autorius mano, kad sąlygos, užtikrinančios spermos paėmimą, apima: dirgiklio buvimą – dažniausiai patelė rujos metu (geriausia rujos piko metu, bet jei patelė elgiasi ramiai, tiks bet koks etapas); atskiras kambarys ir prieiga prie platformos, jei patinas pirmiau norėtų žaisti su patele; minimalus žmonių skaičius. Šios sąlygos teigiamai veikia spermos parametrus ir labai palengvina procedūrą.

Patinui suteikiama galimybė lipti. Prailgindamas varpą nuo apykaulių, operatorius atitraukia pastarąjį atgal ir pirštais uodegiškai suspaudžia varpą prie galvos (9.4 pav.).

Spermos surinkimas neįmanomas, kol nepasiekiama visiška erekcija ir nenutrūksta patino trūkčiojantys judesiai. Spermos rinkimui autorė naudoja vienkartinį piltuvo formos plastikinį puodelį. Atliekant manipuliavimą, būtina atmesti galimybę sužeisti varpą ant indo krašto. Dėl tokio sužalojimo gali plyšti smulkūs indai varpos galvoje ir kraujas patekti į ejakuliatą. Vyresni šunys ypač linkę kraujuoti. Nežinoma, kaip kraujo buvimas veikia spermos parametrus, tačiau jo buvimas apsunkina analizę. Idealiu atveju mėginį turėtų sudaryti tik antroji frakcija (sudėtyje yra spermatozoidų), ypač jei sperma turi būti užšaldyta. Naudojant iš karto dirbtiniam apvaisinimui, į mėgintuvėlį su sperma įpilama 1–2 ml prostatos sekreto ir vartojama be papildomų tirpiklių.

Spermos rinkimas naudojant karštyje kaip stimulą šuns patelę. Operatorius atitraukia prieauglį, sugriebia delne esančias lemputes ir pirštais suspaudžia varpos pagrindą už svogūnėlių. Sperma surenkama tiesiai į plastikinį vamzdelį

Analizės metu nustatoma sėklinio skysčio spalva. Atspalviai nuo pieniškos iki šiek tiek kreminės, priklausomai nuo tankio, laikomi normaliais; geltonas atspalvis yra nepriimtinas ir rodo šlapimo patekimą arba uždegiminį procesą; raudona rodo kraujo buvimą. Ejakuliato spalvos nukrypimo nuo normos priežastis nustatoma mikroskopinio tyrimo metu. Ejakuliatas, kuriame yra baltųjų kraujo kūnelių, raudonųjų kraujo kūnelių arba šlapimo, centrifuguojamas 300–1000 aps./min. greičiu 5 minutes TRIS skiediklyje (9.1 lentelė) arba tirpale, į kurį pridėta antibiotikų, supernatantas pašalinamas, o nuosėdos dar kartą praskiedžiamos šviežiu skiedikliu. kurių sudėtyje yra antibiotikų ir naudojami dirbtiniam apvaisinimui.

Buferio bazėje yra antibiotikų

Trishidroksimetilaminometanas - 6,056 g;

Citrinų rūgštis - 3 400 g;

Fruktozė - 2500 g;

Dvigubai išgrynintas distiliuotas vanduo - 200 ml;

Kristalinis penicilinas - 200 000 vienetų;

Dihidrostreptomicinas - 0,2 g;

Kiaušinio trynys įpilamas prieš pat įpilant vandens (20% tūrio) 2 ml trynio 8 ml TRIS bazės + antibiotikai.

Spermos tankio, t.y. spermos koncentracijos tūrio vienete, įvertinimas atliekamas naudojant skaičiavimo kamerą ir mikroskopą arba fotometrinį spermatozoidų skaitiklį (9.5 pav.). Spermatozoidų skaičius ejakuliate apskaičiuojamas pagal jų skaičių tūrio vienete ir bendrą tūrį. Bendras spermatozoidų skaičius šunų spermoje svyruoja nuo 200 iki 1200 x 10 6, antroje frakcijoje yra 100-700 x 10 6 /ml.

Fotometrinis kalibratorius Spermacue™, skirtas matuoti šviežiai gautos neskiestos šunų ir lapių spermos tankį (spermatozoidų skaičių viename mililitre).

Progresuojantis judrumas (PM) vertinamas vizualiai po mikroskopu su 100 kartų padidinimu. Progresuojančio judrumo rodiklis (spermatozoidų skaičius su ryškiu judesiu į priekį) gali būti minimaliai iki 5%, kai neskiestame šviežiai surinktame ejakuliate norma yra 75–90%. Užšaldytoje spermoje, jei ją ketinama naudoti dirbtiniam apvaisinimui, spermatozoidų judrumas po atšildymo turi būti ne mažesnis kaip 50 proc. Taip pat svarbus rodiklis yra spermatozoidų aktyvumas (judėjimo į priekį greitis), kuriam subjektyviai priskiriama reikšmė nuo 0 iki 5, kur 0 reiškia, kad nėra progresuojančio judėjimo (nekrospermijos), o 5 yra didžiausias. Normalus vaisingas spermatozoidas paprastai turi 3–5 balus; sperma, skirta šaldyti, turi turėti didelio našumo, pageidautina 5. Žema temperatūra sumažina spermatozoidų judrumą, todėl analizei rekomenduojama stiklelį pašildyti, ypač dirbant su atšildyta sperma. Druskos tirpalai, ypač turintys glicerolio, taip pat laikinai sumažina spermatozoidų aktyvumą, tačiau ant pašildyto stiklelio paprastai atsistato per 2–3 minutes.

IN Pastaruoju metu Plačiai naudojamas membranos vientisumo ir spermatozoidų gyvybingumo testas (hipoosmosinis testas). Tyrimas apima spermatozoidų inkubavimą hipoosmosinėje aplinkoje, dėl kurios spermos uodega išsipučia. Šis testas turi gerą koreliaciją su spermatozoidų judrumu ir gyvybingumu, bet ne su spermos koncentracija.

Morfologinė analizė (MA) naudojama normalios išvaizdos spermatozoidų procentinei daliai nustatyti, naudojant fazinio kontrasto mikroskopiją 200 kartų padidinimu arba mažiau galingu mikroskopu, bet vėliau nudažytu nigrozinu-eozinu (žr. 8 skyrių). Morfologiniai rodikliai laikomi normaliais, jei morfologiškai nepakitusių spermatozoidų procentas svyruoja nuo 65 iki 90%. Mažiausias morfologiškai normalių spermatozoidų procentas normaliam vaisingumui palaikyti šunims nenustatytas, tačiau mažesnė nei 60 % vertė paprastai rodo sėklidžių ar prielipo funkcijos sutrikimą. Šunų patinams brendimo metu iki 40 % spermatozoidų gali būti proksimalinių citoplazminių intarpų. Šaldymui skirtoje spermoje turi būti ne mažiau kaip 75 % morfologiškai normalių spermatozoidų.

Akrosomų vientisumo rodiklis ypač svarbus morfologiniam spermatozoidų įvertinimui po atšildymo. Norėdami suskaičiuoti spermatozoidus su nepažeista akrosoma, autoriaus laboratorija naudoja dažymą Spermac™ tirpalu.

Dirbtinai apvaisinant šviežiai surinkta sperma, jo skiesti nebūtina. Tačiau jei sperma turi būti gabenama ir naudojama po 2-3 valandų, ji skiedžiama specialiais skiedikliais ir gabenama 4°C temperatūroje, nes tokios sąlygos padeda išlaikyti spermatozoidų gyvybingumą. Šviežiai surinktai spermai transportuoti autorius sėkmingai naudoja dviejų tipų ekstenderius (9.1 ir 9.2 lentelės).

Eksperimente buvo lyginami skiedikliai, kurių sudėtyje yra kiaušinio trynio, kiaušinio trynio kartu su grietine ir kiaušinio trynio su pienu. TRIS ilgintuvas geriausiai tinka spermai laikyti 4°C temperatūroje. Visuose tirpaluose trynys apsaugo spermos membraną nuo smūgio, kurį sukelia žemos temperatūros poveikis. Spermos skiedimas paprastai atliekamas santykiu 1:6, priklausomai nuo pradinės koncentracijos. Svarbu, kad tirpalo tūris viršytų spermatozoidų tūrį, o jei sperma surinkimo metu nepadalinama į frakcijas, ji centrifuguojama ir, pašalinus prostatos sekreto perteklių, sumaišoma su tirpalu.

Pasterizuota grietinėlė 12% riebumo - 8 ml;

Kiaušinio trynys 20% tūrio - 2 ml.

Aušinimas transportavimo metu užtikrinamas mėginį dedant į termosą, iš dalies pripildytą smulkinto ledo. Mėginiui transportuoti naudokite plastikinius centrifugavimo mėgintuvėlius (pavyzdžiui, 10 ml užsukamo dangtelio mėgintuvėlį ląstelių kultūrai).

Mėgintuvėlis su mėginiu dedamas į izoliuotą kolbą, kolba dedama į termosą ant ledo sluoksnio ir suvyniojama į popierių. Prieš apvaisinimą sperma palaipsniui pašildoma iki 30–35 °C.

Literatūroje pateikiami išsamūs daugelio spermos skiedimo, užšaldymo ir atšildymo protokolų aprašymai. Šio skyriaus autorius mieliau dirba su TRIS skiedikliu, kuris numato geras rezultatas laikant šunų ir lapių spermą. Vėlesnio apvaisinimo sėkmės rodiklis yra 67–80 %, kai intrauterinis apvaisinimas naudojant spermatozoidus, kurių koncentracija yra 50–150 x 10 6 spermatozoidų vienoje dozėje, ir apvaisinimas dviem etapais su 24 valandų intervalu.

Užšaldymui į pradinį TRIS tirpalą pridedama glicerolio ir antibiotikų (9.1 lentelė). Pridedamo glicerino tūris svyruoja nuo 12 iki 16 ml (atitinkamai 6 ir 8 % viso tūrio), priklausomai nuo užšaldymo technikos: automatiniam užšaldymui pridedama 6 % glicerino, o rankiniu būdu – 8 %. Į tirpalą įpilama distiliuoto vandens (188 arba 184 ml vietoj standartinių 200 ml).

Į pradinį TRIS tirpalą su glicerinu įpilkite 20 % kiaušinio trynio. Kiaušinių tryniai gaunami iš vištų, kurios buvo ištirtos dėl patogeninių veiksnių nebuvimo (skirtos eksportui arba naminiams). Trynys atskiriamas nuo baltymo, išdėliojamas ant švaraus popieriaus lapo, atsargiai praduriamas ir supilamas į piltuvėlį ir stipriai plakamas stikline mentele, kiek įmanoma sutraiškant jo daleles – tai padeda sumažinti spermatozoidų galvučių susijungimą su tryniu. dalelių, o tai apsunkina spermos analizę. Galiausiai trynys sumaišomas su TRIS buferiniu tirpalu, pašildytu iki 30°C. Mišinys gerai suplakamas ir pašildomas iki 35°C. Iš anksto paruoštą skiediklį galima užšaldyti ir tokioje formoje laikyti 2 mėnesius. Prieš naudojimą jis atšildomas vandens vonioje 35 ° C temperatūroje.

Mikroskopinis spermatozoidų tyrimas, siekiant nustatyti, ar jis atitinka aukščiau išvardintus kriterijus, tada į antrąją ejakuliato frakciją lašinamas iki 35°C pašildytas skiediklis, kol pasiekiama reikiama koncentracija. Autoriaus laboratorijoje šaldymui dažniausiai naudojami mėginiai, kurių bendra spermos koncentracija yra 100 x 10 6 /ml. Tačiau jei spermos kokybė aukšta, koncentraciją galima sumažinti perpus.

Atskiedus, keli mėginio lašai tiriami mikroskopu, o praskiesta sperma supilama į plastikinius centrifugos mėgintuvėlius, kurie dedami į indą su pašildytu vandeniu iki 35 °C. Tada indas perkeliamas į šaldytuvą ir paliekamas 2 valandoms 4 °C temperatūroje. Per šį laiką spermatozoidai atšaldomi iki 4–5 °C, o glicerolis, kuris veikia kaip apsauginis faktorius, prasiskverbia pro spermos membraną.

Sperma išimama iš šaldytuvo, švelniai suplakama ir nedelsiant dedama į plastikinius 0,5 ml talpos šiaudelius (payettes). Norėdami atlikti procedūrą, naudokite specialų siurbimą arba čiulpkite burną per latekso vamzdelį. Paskirstydami spermą įsitikinkite, kad milteliai, esantys tarp šiaudelių filtrų galų, būtų prisotinti skysčiu ir sukietėtų. Pirmiausia šiaudeliai užpildomi iki pusės, o po to, paliekant oro burbulą, užpilami, nesiekiant 1 cm iki viršaus. Oro burbulas apsaugo nuo spermos perpylimo (dėl slėgio pokyčių atitirpinimo metu). Po to šiaudai užsandarinami.

Yra du alternatyvūs metodai užšaldymas - rankinis (statinis protokolas) ir automatinis (dinaminis protokolas). Glicerino dalis skiediklyje priklauso nuo naudojamo metodo. Rankiniam užšaldymui naudokite polistireninį indą (30 x 40 x 30 cm) su nuimama metaline lentyna, padėta 10 cm žemiau krašto. Talpykla pripildoma skysto azoto iki 4 cm žemiau lentynos lygio.

Užpildyti šiaudeliai (daugiausia 8-10) sugriebiami pincetu, dedami horizontaliai ant lentynos ir paliekami garuojančiame azote 8 minutes. Tada pincetas atšaldomas skystame azotu, juo viena po kitos pakeliamos ir apverčiamos kasetės, kad jų turinys visiškai išsikristalizuotų. Po to kasetės panardinamos į skystą azotą. Ši procedūra vadinama statine dėl nuolatinio nereguliuojamo garuojančio azoto srauto aušinimo ir užšalimo laikotarpiu.

Automatinis užšaldymas apima mašinos naudojimą. Šis metodas vadinamas dinaminiu, nes garuojantis azotas į šaldiklį patenka skirtingu greičiu, priklausomai nuo duota programa, leidžianti reguliuoti užšalimo greitį. Užšaldymo programa atliekama Planer 10™ aparatu, kurį sukūrė Hofmo (1988), skirtą lapių spermai užšaldyti. Šis prietaisas šiuo metu naudojamas autoriaus laboratorijoje, kurioje yra daug spermos mėginių atsargų. Payettes šaldomos horizontaliai ant lentynos su nuimamu dangteliu, o šaldiklyje tokių lentynų gali būti kelios. Užšaldymo programa apima šiuos režimus:

2?S/min. nuo +4 °C iki -7 °C;

50?S/min. -7 °C iki -100 °C;

25?S/min. nuo -100 °C iki -180 °C.

Baigus procedūrą, lentyna dedama tiesiai į skystą azotą.

Pajamos atitirpinamos vandens vonelėje (termose) 70°C temperatūroje 8 sekundes. Po atitirpinimo jie dedami vertikaliai su filtru žemyn, atidengiamas dangtelis ir pakratomas, kad oro burbuliukas pakiltų aukštyn. Šiaudas atidaromas ir keli lašai mėginio užlašinami ant pašildyto stiklelio, kad būtų įvertinti spermos parametrai po atšildymo. Kol spermatozoidų judrumas atsistato, užtrunka šiek tiek laiko, paprastai pakanka 2 minučių. Dėl to, kad įvairios laboratorijos naudoja įvairios technikos užšaldymas, atšildant spermos mėginį, gautą iš konkrečios laboratorijos, būtina griežtai laikytis visų iš ten gautų rekomendacijų, nes šaldymo ir atšildymo procesai yra glaudžiai susiję.

Tai praktikuojama tais atvejais, kai natūralus poravimasis neįmanomas dėl kelių priežasčių: patinas ir patelė gyvena gana toli vienas nuo kito; veisėjas ketina sėklinti keletą kalių arba bijo tiesioginio kalės ir veisėjo kontakto dėl infekcinių ligų paplitimo.

Paprastai tai daroma, jei gamintojas yra toli ir neįmanoma išsiųsti šviežios spermos tiek dėl draudimo gabenti šviežią spermą per sieną, tiek gamintojui mirus. Europoje ir JAV yra spermos bankai nacionaliniuose šunų klubuose mokslo institutai ir kai kuriose privačiose įmonėse.

Jei yra šviežių spermatozoidų, apvaisinimo procedūra atliekama ovuliacijos dieną, o po 2 dienų kartojama. Naudojant sušaldytą spermą, kurios gyvybingumas sumažėjo dėl užšalimo ir atšildymo poveikio Neigiama įtaka ant akrosomų ir spermatozoidų membranų - apvaisinimas atliekamas praėjus 1-2 dienoms po ovuliacijos, o antroji procedūra atliekama 24 valandas po pirmosios. Serumo progesterono tyrimai yra geras ovuliacijos rodiklis. Progesterono koncentracija, nustatyta radioimuniniu tyrimu, pirmąją dieną turi būti 30 nmol/L (10 ng/ml), o antrąją sėklinimo dieną – 55–75 nmol/L (18–25 ng/ml). Kokybiniam ir kiekybiniam progesterono kiekiui įvertinti taip pat tinka greitas su fermentais susietas imunosorbentinis tyrimas (ELISA). Lapėms dirbtinis apvaisinimas leidžia padidinti vados dydį, o tinkamai parinkus datą, apvaisinimas įvyksta po vienos procedūros.

Šviežia sperma į makštį įvedama naudojant kieto plastiko kateterį, panašų į karvių sėklinimui naudojamą tipą, tačiau supjaustoma iki norimo dydžio. Kateteryje yra 2–5 ml švirkštas su guminiu stūmokliu (9.6 pav.). Reikia nepamiršti, kad ne kiekvienas švirkštas gali būti naudojamas, nes kai kurios gumos rūšys turi toksinį poveikį spermai.

Sušvirkštas tūris neturi viršyti 3 ml didelių veislių ir 2 ml mažiems, kitaip sperma gali ištekėti iš kalės lytinių takų. Vulva pakeliama rodomasis pirštas ir palaipsniui įkiškite plastikinį kateterį į makštį. Įdėjus kateterio uodeginį galas pakeliamas ir nukreipiamas išilgai makšties nugarinės sienelės iki makšties skliauto, kad kateteris nepatektų į šlapimo pūslę, nes šlaplės anga yra ant ventralinės makšties sienelės. Antrąja ranka operatorius apčiuopia gimdos kaklelį pilvo siena, reguliuojant kateterio judėjimą. Spermatozoidai įšvirkščiami lėtai, po to patelė 10 minučių laikoma pakelta padėtyje. Vulvos srities glostymas sukelia gimdos susitraukimus, kurie skatina spermatozoidų judėjimą.

Apvaisinimui šviežia ir šaldyta-atšildyta sperma, autorės laboratorijoje sukurtas specialus intrauterinis kateteris (9.6 pav.), susidedantis iš nailoninio kreipiklio ir metalinio kateterio su pritvirtintu švirkštu. Metodas apima kreipiamojo vamzdelio įkišimą į makštį, kurio viduje yra metalinis kateteris; vamzdeliui palietus makšties skliautą, metalinis kateteris stumiamas į priekį ir įkišamas į gimdos kaklelį, laikant jį per sienelę nykščiu ir smiliumi pilvo ertmė(9.7 pav.). Gimdos kaklelio kanalas tiesus su nedidelėmis raukšlėmis, rujos stadijoje beveik visiškai atviras, todėl kateterio įvedimas dažniausiai nesukelia sunkumų. Procedūrai atlikti gyvūnas pakeliamas ant stalo, sedacijos dažniausiai nereikia (9.8 pav.). Manipuliacija reikalauja tam tikrų įgūdžių, patyrusiam operatoriui užtrunka ne ilgiau kaip 1–2 minutes ir nesukelia gyvūnui diskomforto. Atlikus intrauterinį apvaisinimą, kalės dubens srities kelti nebūtina.

Trys įvairių tipų kateteriai su nailoniniu kreipiamuoju vamzdeliu, naudojami šunų transcervikiniam intrauteriniam dirbtiniam apvaisinimui. Žemiau yra įprastas plastikinis kateteris karvėms, sutrumpintas iki reikiamo ilgio šunų intravaginaliniam apvaisinimui

Dirbtinis šuns apvaisinimas naudojant intrauterinį kateterį. Virš kateterio uždedamas plastikinis vamzdelis, kad metaliniu kateteriu būtų išvengta užteršimo makšties mikroflora arba makšties gleivinės pažeidimo.

Transcervikinis dirbtinis apvaisinimas. Gyvūnas yra ant stalo. Sedacija paprastai nereikalinga, o procedūra trunka mažiau nei 5 minutes.

Rekomenduojama dozė intrauteriniam apvaisinimui šaldytais-atšildytais spermatozoidais yra 100 x 10 6 spermatozoidų vienam apvaisinimui, tačiau apvaisinimas užtikrinamas mažesniu spermatozoidų skaičiumi - 35-40 x 10 6 vienam apvaisinimui, jei pasirenkama procedūros data. teisingai ir laikomasi spermos atšildymo technologijos. 100 x 10 6 /ml dozė pagrįsta autorės eksperimentų su lapės sperma rezultatais, kurių metu vados dydis buvo svarbus parametras. Kai apvaisinimas laparotomijos metu gali būti apribotas dar mažesniu spermos kiekiu, tačiau, autoriaus žiniomis, tokie eksperimentai nebuvo atlikti.

Nepaisant intravaginalinio apvaisinimo galimybės, naudojant šaldytą-atšildytą spermą, geriausius rezultatus suteikia intrauterinis apvaisinimas, kuris taip pat leidžia sumažinti spermos dozę.

Jei kateterizacija neįmanoma arba operatorius nėra susipažinęs su technika, rekomenduojamas dirbtinis apvaisinimas laparoskopijos metu arba naudojant endoskopą. JAV ir Kanadoje dažniausiai naudojami chirurginiai dirbtinio apvaisinimo būdai. Tačiau daugumoje Europos šalių intravaginalinis apvaisinimas, taip pat metodai naudojant kateterį ir endoskopą yra laikomi etiškesniais.

Andersen K. (1975) Apvaisinimas sušaldyta šunų sperma, paremtas nauja apvaisinimo technika. Zuchthygiene10 , 1.

Evans H. E. ir deLahunta A. (1971) Millerio vadovas šunų skrodimui. Patikslintas pakartotinis leidimas. W. B. Saunders kompanija, Filadelfija.

Farstad W. (1984a) Kalės vaisingumas po natūralaus poravimosi ir po dirbtinio apvaisinimo šviežiomis arba šaldytomis sėklomis. Smulkių gyvūnų praktikos žurnalas25 , 561–565.

Farstad W. (1984b) Koreliacija tarp ciklo koeficiento, pagrįsto citologiniais indeksais makšties tepinėlyje, ir cirkuliuojančio progesterono rujos kalėse. Zuchthygiene19 , 211–217.

Farstad W. (1992) Optimalus mėlynųjų lapių viksvų dirbtinio apvaisinimo laikas (Alopex lagopus) su užšalusia atšildyta sidabrinių lapių sperma (Vulpes vulpes). Teriogenologija38 , 853–865.

Farstad W. (1996) Šunų ir lapių spermos šaldymas. XIII tarptautinis gyvūnų dauginimo ir dirbtinio apvaisinimo kongresas, Sidnėjus. Gyvūnų reprodukcijos mokslas42 , 1–4, 251–260.

Farstad W. ir Andersen Berg K. (1989) Veiksniai, įtakojantys šunų dirbtinio apvaisinimo sėkmę. 39 , 289–292.

Hofrno P. O. (1988) Lapės spermatozoidų Cr / konservavimo tyrimai ir šaldytų sidabrinių lapių spermatozoidų tręšimo pajėgumo įvertinimas. Doktorantūros darbas, Norvegijos veterinarijos koledžas, Oslas.

Kieffer J. P. (1992) Accouplement dans Tespece canine (poravimasis tarp šunų rūšių) In: Les Inspensables l"Animal de Compagnie. Dauginimas, red. S. Dumon ir A. Fontbonne, p. 67–73. P.M.C.A.C, Paryžius.

Kumi-Diaka J. ir Badtram G. (1994) Laikymo poveikis spermos membranos vientisumui ir kitoms šunų spermatozoidų funkcinėms savybėms: šunų spermos biologinis tyrimas in vitro. Theriogeno/ogv 366. 41 , 1355–1

Laing J. A., Brinley Morgan W. J. ir Wagner W. C. (1988) Vaisingumas ir nevaisingumas veterinarijos praktikoje, 4th edn, p. 10–12 val. Balliere-Tindall, Londonas.

Linde-Forsberg S. (1995) Šunų dirbtinis apvaisinimas šviežiomis, atšaldytomis pailgintomis ir užšaldytomis-atšildytomis sėklomis. Veterinarinės medicinos ir chirurgijos seminarai (smulkūs gyvūnai)1 , 48–58.

Nothling J. O. ir Valkman D. H. (1993) Autologinio prostatos skysčio pridėjimo įtaka užšaldytos ir atšildytos šunų spermos vaisingumui po intravaginalinio apvaisinimo. Reprodukcijos ir vaisingumo žurnalas 47, 325–327.

Oettle E. (1986) Naudojant naują akrosomų dėmę spermos morfologijai įvertinti. Veterinarinė medicina3 , 263–266.

Robertsas S. J. (197 i) Veterinarinė akušerija ir lytinių organų ligos (teriogenologija), p. 609, 620. Edwards Brothers Inc., Ann Arbor Michigan ir Ithaca, Niujorkas.

Rodriguez-Gil J. E., Montserrat A. ir Rigau T. (1994) Hipoosmosinio inkubavimo poveikis akrosomų ir uodegos struktūrai šunų spermatozoidams. Teriogenologija42 , 815–829

Rota A., Strom B. ir Linde-Forsberg S. (1995) Sėklinės plazmos ir trijų užpildų poveikis šunų spermai, laikomai 4 °C temperatūroje . Teriogenologija44 , 885–887.

Silva L. D. M., Onclin K., Snaps F. ir Verstegen J. (1995) Laparoskopinis intrauterinis kalės apvaisinimas. Teriogenologija43 , 615–623.

Wilson M. (1993) Nechirurginis dirbtinis kalių apvaisinimas naudojant šaldytą spermą. Reprodukcijos ir vaisingumo žurnalas47 , 307–311.

Panašūs straipsniai

Vaško būrimo reikšmės

Čigonų ateities spėjimas kortose už meilę

Ateities spėjimas su vaško pelėdos reikšme

Augalų reikšmių aiškinimas